[發明專利]誘導骨骼肌衛星細胞生成脂滴的方法

有效

• 申請號: 202011076142.8
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN114317417B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 邱小宇;齊仁立;黃金秀;楊飛云;王琪;王敬
• 申請（專利權）人: 重慶市畜牧科學院
• 主分類號: C12N5/077
• 分類號: C12N5/077
• 代理公司: 重慶弘旭專利代理有限責任公司 50209
• 代理人: 張建

1.誘導骨骼肌衛星細胞生成脂滴的方法，其特征在于，包括以下步驟：?從剛出生1-5d的仔豬背肌中采集骨骼肌衛星細胞，并純化，純化后的骨骼肌衛星細胞待貼壁匯合到60％-70％時，進行生脂誘導；所述純化采用差速貼壁方法；所述生脂誘導包括以下步驟：

第1-2d，向基礎培養基中添加地塞米松、胰島素、3-異丁基-1-甲基黃嘌呤和雙抗，培養2d；

第3-4d，向基礎培養基中添加胰島素、羅格列酮和雙抗，培養2d；

第5-6d，向基礎培養基中添加地塞米松、胰島素、3-異丁基-1-甲基黃嘌呤和雙抗，培養2d；

第7-8d，向基礎培養基中添加胰島素、羅格列酮和雙抗，培養2d；?第9-10d，基礎培養基中添加葡萄糖和雙抗，培養2d。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述基礎培養基采用DMEM/F12培養基。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，第1-2d，向基礎培養基中添加0.5-1μmol/L地塞米松、5-10μg/mL胰島素、0.1-0.5mmol/L?3-異丁基-1-甲基黃嘌呤和1％-1.5％雙抗，培養2d，所述百分比為體積百分比。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，第3-4d，向基礎培養基中添加5-10μg/mL胰島素、5-10uM羅格列酮和1％-1.5％雙抗，培養2d，所述百分比為體積百分比。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，第5-6d，向基礎培養基中添加0.5-1μmol/L地塞米松、5-10μg/mL胰島素、0.1-0.5mmol/L?3-異丁基-1-甲基黃嘌呤和1％-1.5％雙抗，培養2d，所述百分比為體積百分比。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，第7-8d，向基礎培養基中添加5-10μg/mL胰島素、5-10uM羅格列酮和1％-1.5％雙抗，培養2d，所述百分比為體積百分比。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，第9-10d，向基礎培養基中添加5-10mM葡萄糖和1％-1.5％雙抗，培養2d，所述百分比為體積百分比。