[發(fā)明專(zhuān)利]鱗翅目活性Cry1Da1氨基酸序列變異蛋白

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011075400.0
• 申請(qǐng)日: 2015-10-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112175052A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J·A·鮑姆;T·切魯?shù)?/a>;S·弗拉辛斯基;付曉然;A·R·豪;S·A·薩爾瓦多
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 孟山都技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K14/325
• 分類(lèi)號(hào): C07K14/325;C12N15/32;A01N63/50;A01N57/16;A01P7/04;C12N15/82;C12N5/10;A01H5/00;A01H6/46;A01H6/60;A01H6/54
• 代理公司: 北京市金杜律師事務(wù)所 11256
• 代理人: 孟凡宏;謝燕軍

本文提供相比于天然存在的Cry1Da蛋白毒素表現(xiàn)出改善的鱗翅目殺蟲(chóng)活性和增強(qiáng)的鱗翅目譜的工程化的Cry1Da氨基酸序列。還提供了旨在用于在植物中表達(dá)所述改善的蛋白的多核苷酸序列。具體實(shí)施方案提供含有昆蟲(chóng)抑制量的工程化的蛋白的組合物，以及含有編碼一種或多種所述改善的工程化的蛋白的多核苷酸構(gòu)建體的重組植物、植物部分和種子。

本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2015年10月15日、申請(qǐng)?zhí)枮?01580055966.8、發(fā)明名稱(chēng)為“鱗翅目活性Cry1Da1氨基酸序列變異蛋白”的發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。

相關(guān)申請(qǐng)的引用

本申請(qǐng)要求2014年10月16日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)62/064,994和2014年10月17日提交的62/065,017的權(quán)益，其各自通過(guò)引用整體并入本文。

序列表的并入

序列表的計(jì)算機(jī)可讀形式隨同電子提交稿一起提交。序列表通過(guò)引用整體并入，被包含在2015年10月13日創(chuàng)建的文件中，具有文件名P34223WO00_SEQ_PCT.txt，并且文件大小為327,235個(gè)字節(jié)(如在MS-操作系統(tǒng)中測(cè)量)。

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明一般涉及昆蟲(chóng)抑制蛋白的領(lǐng)域。本文公開(kāi)了一類(lèi)新型的表現(xiàn)出針對(duì)作物植物和種子的農(nóng)業(yè)上相關(guān)的害蟲(chóng)的昆蟲(chóng)抑制活性的工程化的蛋白。具體地，公開(kāi)的這類(lèi)工程化的抑制蛋白具有針對(duì)鱗翅目昆蟲(chóng)害蟲(chóng)的殺蟲(chóng)活性。本文提供含有編碼一種或多種公開(kāi)的工程化的抑制蛋白的多核苷酸構(gòu)建體的植物、植物部分以及種子。

發(fā)明背景

美洲棉鈴蟲(chóng)(Helicoverpa zea)是主要農(nóng)作物(包括玉米、棉花和大豆)的重要鱗翅目害蟲(chóng)。被稱(chēng)為玉米穗蟲(chóng)(CEW)、棉鈴蟲(chóng)(CBW)和大豆莢蟲(chóng)(SPW)的此多食性昆蟲(chóng)物種特別難以用來(lái)自蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)(Bt)或其它細(xì)菌物種的殺蟲(chóng)蛋白來(lái)控制。由于其能夠以許多不同作物為食物和目前缺乏高劑量的控制策略，美洲棉鈴蟲(chóng)(H.zea)被認(rèn)為處于對(duì)目前的昆蟲(chóng)控制性狀形成抗性的風(fēng)險(xiǎn)中。因此，需要新的作用方式(MoA)以確保保護(hù)免遭美洲棉鈴蟲(chóng)攝食損傷的轉(zhuǎn)基因植物的耐久性。

Cry1Da1蛋白是首先由Hofte,等人“Nucleotide sequence and deduced aminoacid sequence of a new Lepidoptera-specific crystal protein gene fromBacillus thuringiensis.”Nucleic Acids Res.18(18)(1990):5545描述的鱗翅目活性蛋白。這種蛋白表現(xiàn)出對(duì)夜蛾(Spodoptera)物種(包括草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)(草地貪夜蛾，F(xiàn)AW)，一類(lèi)幾種作物(包括玉米、棉花和大豆)的害蟲(chóng))極好的殺蟲(chóng)活性。然而，Cry1Da1表現(xiàn)出對(duì)各種其它主要鱗翅目害蟲(chóng)，包括螟蛉(例如，棉鈴蟲(chóng)(Helicoverpaarmigera)和美洲棉鈴蟲(chóng))、螟蟲(chóng)(例如，歐洲玉米螟(Ostrinia nubilalis)和西南玉米桿草螟(Diatraea grandiosella))和大豆尺蠖(大豆夜蛾(Pseudoplusia includens))的低到中等的活性。由于其窄的殺蟲(chóng)譜和其無(wú)法提供針對(duì)一系列重要鱗翅目農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)(諸如CEW)的商業(yè)級(jí)保護(hù)，因此Cry1Da1殺蟲(chóng)蛋白具有作為轉(zhuǎn)基因植物昆蟲(chóng)控制性狀的有限價(jià)值。結(jié)果，目前沒(méi)有商業(yè)品種的抗蟲(chóng)作物利用Cry1Da1作為植物結(jié)合殺蟲(chóng)劑(plant-incorporatedprotectant)。