[發(fā)明專利]一種用于免疫細(xì)胞p16染色的封閉液

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011074975.0
• 申請日: 2020-10-09
• 公開（公告）號(hào): CN112034158B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱峻;杰西卡·朱
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市森盈生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/53
• 分類號(hào): G01N33/53;G01N33/574
• 代理公司: 深圳市精英創(chuàng)新知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44740
• 代理人: 黃文鋒

本發(fā)明提供一種用于免疫細(xì)胞p16染色的封閉液，涉及封閉液技術(shù)領(lǐng)域，該用于免疫細(xì)胞p16染色的封閉液，包括如下重量份的原料：非免疫血清6－16份、緩沖液40－60份、脫脂奶粉20－30份、甲醛6－18份、去污劑10－20份、聚環(huán)氧乙烷4－12份、明膠4－14份、蒸餾水100－120份。該用于免疫細(xì)胞p16染色的封閉液，不與哺乳動(dòng)物抗體反應(yīng)，蛋白A反應(yīng)產(chǎn)生假陽性，不掩蓋、破壞結(jié)合位點(diǎn)產(chǎn)生假陰性，對包被的反應(yīng)物質(zhì)有穩(wěn)定作用；含有在室溫和室溫以下易溶的組分，不含哺乳動(dòng)物可能會(huì)有的傳染性物質(zhì)，保護(hù)操作人員，批件的一致性良好，變異小，同時(shí)，甲醛、聚環(huán)氧乙烷及吐溫－20，使得封閉液具有良好的封閉效果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及封閉液技術(shù)領(lǐng)域，特別的為一種用于免疫細(xì)胞p16染色的封閉液。

背景技術(shù)

宮頸癌是婦科最常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于乳腺癌，位居女性惡性腫瘤第二位，嚴(yán)重威脅女性的身體健康和生活質(zhì)量。中國是宮頸癌的高發(fā)國家，發(fā)生率及死亡率約占全世界的1/3。宮頸癌也是目前唯一病因明確，原位癌高發(fā)年齡為30～35歲，浸潤癌為45～55歲，近年來其發(fā)病有年輕化的趨勢，通過有效的早期診斷及治療可以完全治愈的癌癥。

在免疫組織化學(xué)反應(yīng)中，抗體能夠識(shí)別抗原決定簇，然后與之特異性結(jié)合。封閉液作用原理主要是通過蛋白非特異性地與表面的抗原決定簇結(jié)合，導(dǎo)致特異性的抗體不能跟這些非特異性的抗原決定簇結(jié)合，染色背景就會(huì)降低，但是傳統(tǒng)的封閉液采用動(dòng)物非免疫血清進(jìn)行制備，如專利公開號(hào)為CN110501201A的專利，動(dòng)物非免疫血清制備的封閉液，存在易與蛋白A反應(yīng)、不適于室溫或低溫的檢測、易攜帶動(dòng)物疾病的問題，同時(shí)，傳統(tǒng)的封閉液，封閉效果不佳，無法滿足使用者的需求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供的發(fā)明目的在于提供一種用于免疫細(xì)胞p16染色的封閉液，存在不會(huì)與哺乳動(dòng)物抗體反應(yīng)、適于室溫或低溫的檢測、不攜帶動(dòng)物疾病及封閉作用好的效果。

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：一種用于免疫細(xì)胞p16染色的封閉液，包括如下重量份的原料：非免疫血清6－16份、緩沖液40－60份、脫脂奶粉20－30份、甲醛6－18份、去污劑10－20份、聚環(huán)氧乙烷4－12份、明膠4－14份、蒸餾水100－120份。

作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：包括如下重量份的原料：非免疫血清8－14份、緩沖液42－58份、脫脂奶粉22－28份、甲醛8－16份、去污劑12－18份、聚環(huán)氧乙烷6－10份、明膠6－12份、蒸餾水102－118份。

作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：包括如下重量份的原料：非免疫血清10－12份、緩沖液44－56份、脫脂奶粉24－26份、甲醛10－14份、去污劑14－16份、聚環(huán)氧乙烷8－9份、明膠8－10份、蒸餾水104－116份。

作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：包括如下重量份的原料：非免疫血清11份、緩沖液50份、脫脂奶粉25份、甲醛12份、去污劑15份、聚環(huán)氧乙烷8份、明膠9份、蒸餾水110份。

作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：所述緩沖液為三羥甲基氨基甲烷溶液、3－嗎啉丙磺酸溶液中的一種。

作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：所述去污劑為吐溫－20。

作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：所述非免疫血清為魚血清。

一種用于免疫細(xì)胞p16染色的封閉液的制備方法，包括以下步驟：

S1、將蒸餾水置于容器中，再將脫脂奶粉放入，進(jìn)行溶解。

S2、將脫脂奶粉溶液置于攪拌機(jī)中，向脫脂奶粉溶液中加入甲醛、聚環(huán)氧乙烷和明膠，進(jìn)行均勻攪拌。

S3、將非免疫血清、緩沖液和去污劑加入到攪拌機(jī)中進(jìn)行攪拌，并調(diào)節(jié)pH至7.2－7.6，制得封閉液。