[發(fā)明專利]一種環(huán)狀RNA circ_029155及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011060225.8
• 申請日: 2020-09-30
• 公開（公告）號: CN112126648A
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馬友記;李討討;郭云霞;王慧慧;雒瑞瑞;姜仲文;張勇;趙興緒
• 申請（專利權(quán)）人: 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/6883;A61K31/7105;A61P15/08
• 代理公司: 北京科億知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

本發(fā)明公開了一種環(huán)狀RNA circ_029155及其應(yīng)用，本發(fā)明以3月齡(性成熟前)、1歲齡(性成熟后)和3歲齡(成年)的健康雄性藏綿羊睪丸組織作為試驗(yàn)材料，通過RNA?seq技術(shù)及相關(guān)生物信息學(xué)分析方法對睪丸中circRNA進(jìn)行鑒定分析，篩選出與睪丸發(fā)育相關(guān)的環(huán)狀RNA circ_029155，如SEQ ID No：1所示，進(jìn)而了解其在綿羊精子發(fā)生及睪丸功能維持中的作用機(jī)制。在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明公開了上述環(huán)狀RNA circ_029155在作為檢測藏綿羊睪丸功能或發(fā)育狀況的標(biāo)志物、在制備調(diào)控藏綿羊睪丸功能或發(fā)育的藥物以及在下游靶基因BOLL的表達(dá)分析或研究中的應(yīng)用。本發(fā)明環(huán)狀RNA circ_029155能夠用于檢測和評價綿羊的睪丸發(fā)育和生精功能，為進(jìn)一步探索綿羊睪丸發(fā)育及精子發(fā)生的分子作用機(jī)制以及后續(xù)應(yīng)用開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種環(huán)狀RNA circ_029155及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

睪丸組織作為雄性動物特有的生殖器官，主要生物學(xué)功能是產(chǎn)生雄性配子 (精子發(fā)生)和分泌雄激素，是種族繁衍不可或缺的。揭示睪丸發(fā)育的調(diào)控機(jī)理對于提高種公畜的繁殖力及防治繁殖障礙性疾病具有重要意義。然而，目前在家畜，尤其綿羊上有關(guān)睪丸功能維持的分子機(jī)理還遠(yuǎn)未闡明。藏綿羊主要分布于海拔3000米以上的青藏高原及其毗鄰地區(qū)，是當(dāng)?shù)剞r(nóng)牧民重要的生產(chǎn)生活資料，并且在草地生態(tài)系統(tǒng)中扮演重要角色。然而，由于其長期放牧且缺乏補(bǔ)飼，其具有發(fā)育周期長、性成熟晚、繁殖力低等生殖特點(diǎn)，是探究種公羊睪丸發(fā)育及功能維持調(diào)控機(jī)制的理想綿羊品種。

環(huán)狀RNA(circRNA)是前體mRNA在成熟過程中形成的一類豐富表達(dá)且具有閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)的內(nèi)源性非編碼RNA。其作為一種競爭性非編碼RNA，可充當(dāng)miRNA的海綿，從而調(diào)控下游基因的表達(dá)與功能。然而，目前尚未有 circRNA在綿羊睪丸發(fā)育及功能維持檢測方面的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，本發(fā)明的目的在于提供一種環(huán)狀RNA circ_029155及其應(yīng)用。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種環(huán)狀RNA circ_029155，其核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。

本發(fā)明進(jìn)一步公開了上述環(huán)狀RNA circ_029155在作為檢測藏綿羊睪丸功能或發(fā)育狀況的標(biāo)志物中的應(yīng)用。

本發(fā)明進(jìn)一步公開了上述環(huán)狀RNA circ_029155在制備調(diào)控藏綿羊睪丸功能或發(fā)育的藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述環(huán)狀RNA circ_029155調(diào)控藏綿羊睪丸功能和發(fā)育是通過如下方式實(shí)現(xiàn)：所述環(huán)狀RNA circ_029155競爭性靶向結(jié)合oar-miR-760-3p以調(diào)控下游靶基因BOLL的表達(dá)，實(shí)現(xiàn)藏綿羊睪丸功能或發(fā)育的調(diào)控。

本發(fā)明進(jìn)一步公開了上述環(huán)狀RNA circ_029155在下游靶基因BOLL的表達(dá)分析或研究中的應(yīng)用。

為克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)和不足，本發(fā)明公開了一種環(huán)狀RNA circ_029155 及其應(yīng)用。本發(fā)明環(huán)狀RNA circ_029155的篩選方法包括步驟：