[發(fā)明專利]一種誘導脂肪干細胞定向分化為人皮膚成纖維細胞的方法及用途有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011059247.2 | 申請日： | 2020-09-30 |
| 公開（公告）號： | CN112280731B | 公開（公告）日： | 2022-07-22 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張躍進;楊真;鐘美玲;李光輝;王娟;葉夢秋;劉琪 | 申請（專利權(quán)）人： | 華東交通大學 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071;C12N13/00 |
| 代理公司： | 武漢誠儒知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 42265 | 代理人： | 劉天鈺 |
| 地址： | 330013 江西省南*** | 國省代碼： | 江西;36 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 誘導 脂肪 干細胞 定向 分化 為人 皮膚 纖維 細胞 方法 用途 | ||
1.一種誘導脂肪干細胞定向分化為人皮膚成纖維細胞的方法，其特征在于包括以下步驟：（1）、以分離的三代人脂肪干細胞為原材料，對其構(gòu)建基于3D-MTC的超分辨生物力學平臺中并進行培養(yǎng)；
具體構(gòu)建方法為：（a）對視野下的橢圓形細胞確定范圍，圍繞細胞作一個能將細胞全部包含的面積最小的橢圓，以該橢圓長軸為細胞的長軸，建立相應的二維平面；
（b）設(shè)定平行于細胞長軸方向為二維坐標系的長軸，垂直于細胞長軸方向為短軸，加力方向與長軸之間的角度為θ；
（c）在上述的二維坐標的基礎(chǔ)上構(gòu)建三維坐標模型，對細胞在不同角度進行加力，構(gòu)建多模態(tài)三維生理力學信號模型；
（d）在脂肪干細胞的表面粘附磁球，然后磁化器產(chǎn)生脈沖，沿著與細胞平面垂直的Z軸方向?qū)︷じ皆诩毎砻娴拇徘蜻M行磁化，每隔一定時間需要對磁球進行重新磁化，以維持其磁場強度和方向不變；
（e）對磁球施加與細胞長軸成0~90°角度的正弦外磁場，磁球在外加磁場的作用下產(chǎn)生力矩，并施加在以綠色熒光蛋白標記的三代人脂肪干細胞的表面；具體通過電流控制外加磁場，從而實現(xiàn)對于細胞所施加力學刺激進行精確控制；
（2）、通過基于3D-MTC的超分辨生物力學平臺對脂肪干細胞施加力學刺激，通過改變力學信號的參數(shù)設(shè)置，調(diào)控ADSCs向皮膚成纖維細胞定向分化；具體的力學刺激信號參數(shù)為：頻率： 1~3 Hz；幅度： 30%；強度： 12 kPa；加力時間： 8 hours/d；加力角度： 90°；加力方式：正弦波。
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