[發明專利]一種誘導脂肪干細胞定向分化為人皮膚成纖維細胞的方法及用途

有效

• 申請號: 202011059247.2
• 申請日: 2020-09-30
• 公開（公告）號: CN112280731B
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 張躍進;楊真;鐘美玲;李光輝;王娟;葉夢秋;劉琪
• 申請（專利權）人: 華東交通大學
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N13/00
• 代理公司: 武漢誠儒知識產權代理事務所(普通合伙) 42265
• 代理人: 劉天鈺

1.一種誘導脂肪干細胞定向分化為人皮膚成纖維細胞的方法，其特征在于包括以下步驟：（1）、以分離的三代人脂肪干細胞為原材料，對其構建基于3D-MTC的超分辨生物力學平臺中并進行培養；

具體構建方法為：（a）對視野下的橢圓形細胞確定范圍，圍繞細胞作一個能將細胞全部包含的面積最小的橢圓，以該橢圓長軸為細胞的長軸，建立相應的二維平面；

（b）設定平行于細胞長軸方向為二維坐標系的長軸，垂直于細胞長軸方向為短軸，加力方向與長軸之間的角度為θ；

（c）在上述的二維坐標的基礎上構建三維坐標模型，對細胞在不同角度進行加力，構建多模態三維生理力學信號模型；

（d）在脂肪干細胞的表面粘附磁球，然后磁化器產生脈沖，沿著與細胞平面垂直的Z軸方向對黏附在細胞表面的磁球進行磁化，每隔一定時間需要對磁球進行重新磁化，以維持其磁場強度和方向不變；

（e）對磁球施加與細胞長軸成0~90°角度的正弦外磁場，磁球在外加磁場的作用下產生力矩，并施加在以綠色熒光蛋白標記的三代人脂肪干細胞的表面；具體通過電流控制外加磁場，從而實現對于細胞所施加力學刺激進行精確控制；

（2）、通過基于3D-MTC的超分辨生物力學平臺對脂肪干細胞施加力學刺激，通過改變力學信號的參數設置，調控ADSCs向皮膚成纖維細胞定向分化；具體的力學刺激信號參數為：頻率： 1~3 Hz；幅度： 30%；強度： 12 kPa；加力時間： 8 hours/d；加力角度： 90°；加力方式：正弦波。