[發(fā)明專利]一種促進(jìn)耳蝸毛細(xì)胞再生的肽段Tr及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011059153.5
• 申請(qǐng)日: 2020-09-30
• 公開（公告）號(hào): CN112194717B
• 公開（公告）日: 2021-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 柴人杰;齊潔玉;高下;唐明亮;付小龍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東南大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K14/47
• 分類號(hào): C07K14/47;C12N15/12;C12N15/864;C12N5/10;A61K38/17;A61P27/16
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 殷星

本發(fā)明公開了一種促進(jìn)耳蝸毛細(xì)胞再生的肽段Tr及其應(yīng)用。本發(fā)明通過復(fù)制肽段Tr，并構(gòu)建Anc80L65?Tr病毒，將Anc80L65?Tr病毒注射進(jìn)入P2幼鼠的內(nèi)耳一個(gè)月后，小鼠的內(nèi)毛細(xì)胞附近出現(xiàn)了新生毛細(xì)胞，且SEM數(shù)據(jù)表明，這些新生的毛細(xì)胞表現(xiàn)出一定的內(nèi)毛細(xì)胞的形態(tài)特征。新生毛細(xì)胞表面有成束的靜纖毛，部分細(xì)胞表面的靜纖毛呈現(xiàn)階梯狀排列，肽段Tr具有促進(jìn)毛細(xì)胞再生的功能。這一發(fā)現(xiàn)為感音神經(jīng)性聾找到新的治療方向，為替代人工耳蝸實(shí)現(xiàn)真正意義上聽覺功能的恢復(fù)，具有巨大的臨床潛在應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物學(xué)內(nèi)耳研究領(lǐng)域，具體涉及一種促進(jìn)耳蝸毛細(xì)胞再生的肽段Tr及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

聽力損失是一種常見的感覺缺陷，影響了超過世界人口的6.8%。超過半數(shù)的感覺神經(jīng)性耳聾是由于毛細(xì)胞和支持細(xì)胞發(fā)生基因突變?cè)斐傻摹６沁z傳性感音神經(jīng)性聾的主要誘因有噪音暴露，耳毒性藥物暴露和老年性聾。感音神經(jīng)性耳聾主要表現(xiàn)為耳蝸正常結(jié)構(gòu)的損傷，尤以毛細(xì)胞的損傷為主。通常認(rèn)為，毛細(xì)胞的損傷是不可逆的。

目前，對(duì)耳聾的治療方法主要以器械輔助為主，人工耳蝸是當(dāng)前恢復(fù)患者聽覺功能的主要技術(shù)工具。對(duì)于嚴(yán)重的SNHL患者，人工耳蝸可以通過不同頻率的電刺激，模擬毛細(xì)胞產(chǎn)生的信號(hào)，傳遞給殘余的螺旋神經(jīng)元(SGNs)。目前臨床上對(duì)于遺傳性耳聾的治療除了佩戴助聽器和人工耳蝸植入尚無其他有效手段。人工耳蝸產(chǎn)生的信號(hào)與正常耳蝸毛細(xì)胞產(chǎn)生的信號(hào)有很大的不同，需要長期的康復(fù)治療才能最大限度地從植入物中獲益。并且，多達(dá)50%的人工耳蝸植入者在人工耳蝸植入后會(huì)出現(xiàn)漸進(jìn)性聽力損失(即毛細(xì)胞功能喪失)。這可能發(fā)生在植入后不久，作為外科創(chuàng)傷的結(jié)果。此外，許多病人不愿意接受植入物，因?yàn)槿斯ざ佒踩雽⑿盘?hào)接收器裝置永久地留在頭部表面。因此，聽覺功能恢復(fù)的生物治療方法需求很大。我們希望從內(nèi)耳中直接恢復(fù)毛細(xì)胞的數(shù)量和功能達(dá)到恢復(fù)聽覺的效果。

以干細(xì)胞為核心的再生醫(yī)學(xué)為我們提供了一個(gè)充滿希望的解決方案。研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)耳中Lgr5陽性支持細(xì)胞是內(nèi)耳干細(xì)胞，調(diào)控內(nèi)耳干細(xì)胞中的一些信號(hào)通路，如Wnt、Aoth1等后能夠提高其再生毛細(xì)胞的能力。現(xiàn)有技術(shù)雖然可以使部分支持細(xì)胞再生為毛細(xì)胞，但效果并不理想，主要表現(xiàn)在再生毛細(xì)胞的穩(wěn)定性和功能性與正常毛細(xì)胞相比有一定的差異。參與毛細(xì)胞再生的分子機(jī)制也不是很清楚，我們無法從基因水平精確干預(yù)產(chǎn)生功能性新生毛細(xì)胞。內(nèi)耳毛細(xì)胞的再生過程極其復(fù)雜，可能是多基因多信號(hào)通路相互作用的結(jié)果，未知性強(qiáng)，探究深度較高，需要較長的時(shí)間去探究這一復(fù)雜過程。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)哺乳動(dòng)物聽覺系統(tǒng)中毛細(xì)胞再生的問題，本發(fā)明提供了一種促進(jìn)耳蝸毛細(xì)胞再生的肽段Tr及其應(yīng)用，該項(xiàng)應(yīng)用從根本上解決聽覺系統(tǒng)的基礎(chǔ)問題，使得聽力受損的動(dòng)物達(dá)到恢復(fù)聽力的效果，從而代替人工耳蝸實(shí)現(xiàn)真正意義上聽覺功能的恢復(fù)。

一種肽段Tr，所述肽段Tr具有促進(jìn)耳蝸毛細(xì)胞再生的活性，且所述肽段Tr的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

SEQ ID NO：1：

PSQRQWVSSATSANDSFEIRPSSKPDMETIPIGDLQARALANLRVNSRNSFVLIPKRKAPGNYPLAGRQFEEPKGEVGWASQSQGLGSQLVSTVDGAPALEKSPLAAEMQWAVRKGACPRPAISDTDKCVRWQRPASPPPFLPATAEAEPAEGLGVPGLAKNGQEPVRPGLPVTFIDEVDSEEEAF

一組分離的核酸分子，所述核酸分子編碼權(quán)利要求1所述的肽段Tr，核酸序列如SEQ ID NO：2所示。

SEQ ID NO：2：