[發(fā)明專利]抑制乳酸代謝和乙醇產(chǎn)生的重組耐酸酵母及使用其生產(chǎn)乳酸的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011053020.7
• 申請日: 2020-09-29
• 公開（公告）號: CN112725210A
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 樸宰演;李泰榮;李氣成
• 申請（專利權(quán)）人: SK新技術(shù)株式會社
• 主分類號: C12N1/19
• 分類號: C12N1/19;C12N15/53;C12N9/04;C12N15/113;C12P7/56;C12R1/645
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 劉翠娥;羅達(dá)

1.一種具有乳酸產(chǎn)生能力的重組菌株，其中從耐酸酵母YBC菌株(KCTC13508BP)中缺失或減弱編碼將乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸的酶的基因，并且將編碼乳酸脫氫酶的基因引入所述耐酸酵母YBC菌株。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組菌株，其中所述編碼將乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸的酶的基因為g2947基因。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組菌株，其中，所述g2947基因具有SEQ ID NO:1或SEQ IDNO:2的核苷酸序列。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組菌株，其中編碼醇脫氫酶的基因被進(jìn)一步缺失。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的重組菌株，其中所述編碼醇脫氫酶的基因為g4423基因。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的重組菌株，其中編碼丙酮酸脫羧酶的基因被進(jìn)一步缺失。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的重組菌株，其中所述編碼丙酮酸脫羧酶的基因為g3002基因。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組菌株，其中所述編碼乳酸脫氫酶的基因通過取代所述g2947基因而被引入，并由所述g2947基因的啟動子調(diào)控。

9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組菌株，其中與作為親本菌株的所述YBC菌株(KCTC13508BP)相比，由于所述g2947基因的缺失或減弱，所述重組菌株具有提高的乳酸產(chǎn)生能力，且降低或失去乙醇產(chǎn)生能力。

10.一種具有乳酸產(chǎn)生能力的重組菌株，其中，從耐酸酵母YBC菌株(KCTC13508BP)中缺失g2947基因、g4423基因和g3002基因，并將編碼乳酸脫氫酶的基因引入所述菌株，其中所述g2947基因為編碼將乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸的酶的基因，所述g4423基因為編碼醇脫氫酶的基因，所述g3002基因為編碼丙酮酸脫羧酶的基因。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的重組菌株，其中所述編碼乳酸脫氫酶的基因通過取代所述g2947基因、所述g4423基因和所述g3002基因中的至少一個而被引入，并由所述被取代的基因的啟動子調(diào)控。

12.一種生產(chǎn)乳酸的方法，其包括：

(a)培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求1-11中任一項所述的重組菌株以產(chǎn)生乳酸；和

(b)獲得所產(chǎn)生的乳酸。

13.一種編碼蛋白的基因，所述蛋白具有將乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸的酶促活性，并且具有SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的基因，其中所述基因具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。

15.一種g2947基因的啟動子，所述啟動子具有SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列。