[發明專利]一種二氯喹啉酸降解微生物菌劑制備及應用

有效

• 申請號: 202011052135.4
• 申請日: 2020-09-29
• 公開（公告）號: CN112143657B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 顧文杰;楊少海;盧鈺升;解開治;王丹;徐培智;石超宏;孫麗麗
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院農業資源與環境研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;B09C1/10;A01N63/30;A01P5/00;C09K17/14;C12R1/79;C09K101/00
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝

本發明公開了一種二氯喹啉酸降解微生物菌劑制備及應用，本發明的微生物土壤修復劑包括淡紫擬青霉，對二氯喹啉酸具有較好的降解效果。該菌株可以降解地膜，防治根際線蟲，利用該解決二氯喹啉酸的殘留藥害可以發揮該菌的多重功效，無環境風險。成本低。純微生物制劑，安全性高，無二次污染。

技術領域

本發明屬于農業環境土壤修復技術領域，特別涉及一種二氯喹啉酸降解微生物制備及應用。

背景技術

近年來存在著盲目用藥，過量用藥等不規范的用藥行為，不僅導致了農作物藥害事件的增多，還造成了土壤污染。為了環境的修復，治理農藥污染的土地迫在眉睫。

二氯喹啉酸，商品名為快殺稗、殺稗靈或神鋤等，它是一種激素型除草劑，作用靶標為植物體內的合成激素。主要是通過干擾植物體內激素調節的酶活性，阻礙生物體的生長、代謝，使其不能正常進行，從而出現葉子變小、扭曲、顏色加深、生物量減少的現象。嚴重的可以使枯萎壞死，甚至使整株死亡而達到除草的目的。

二氯喹啉酸主要用于水稻田除草，主要是在芽前苗后噴施。除了應用在水稻田外，二氯喹啉酸還可用于草坪、休耕地、小麥、大豆、高梁和玉米等作物田，大多用于防治馬唐、稗草等禾本科雜草及一些闊葉雜草。

二氯喹啉酸藥具有用量少，殘效期長，對稗草特效、施用適期寬等優點。但是，該藥容易在土壤中積累，土壤殘留量較大，殘留的期限比較長，易對后茬作物產生藥害。南方地區氣候炎熱，種植周期短，部分地區習慣水旱輪作，水稻收獲后種植馬鈴薯、煙草等作物。但是這些作物對二氯喹啉酸都非常敏感，二氯喹啉酸會嚴重抑制作物正常生長，造成減產甚至絕產。目前，暫時缺乏針對二氯喹啉酸污染土壤的原位修復劑，既能夠解決土壤污染問題，又能夠減輕或消除因二氯喹啉酸殘留造成的作物生長抑制，成為亟待解決的問題。

發明內容

本發明的首要目的在于提供一種二氯喹啉酸降解微生物菌劑制備及應用。通過該菌劑的應用減輕二氯喹啉酸殘留對下茬作物的影響，從而實現土壤環境的原位修復。

為達到上述目的，本發明所采取的技術方案是：

本發明提供了一種微生物土壤修復劑，包括將微生物菌劑接種在PDA培養基長孢子后，再接種在含有葡萄糖的共代謝培養基發酵制得；所述的微生物菌劑為淡紫擬青霉。

根據本發明的實施例，本發明使用了含有淡紫擬青霉GFDZ1的液體菌劑。

本發明所用的菌株為淡紫擬青霉GFDZ1，保藏編號為GDMCC NO：60131，2016年12月12日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏地址為廣東省廣州市越秀區先烈中路100號大院實驗大樓5樓，廣東省微生物研究所，建議分類名為Paecilomyces lilacinus，已于2016年12月16日鑒定保藏菌株為存活的。

本發明又一方面提供了微生物土壤修復劑即二氯喹啉酸降解微生物菌劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)將保存菌株淡紫擬青霉GFDZ1的斜面上接種至PDA固體培養基上，置于30℃的恒溫培養箱中培養5d，長出大量孢子后，在平板中加入少量滅菌無機鹽培養基，并刮下平板上生長的孢子，用四層紗布過濾以除去菌絲體，得到孢子懸液，用分光光度計測定孢子懸液的吸光度，使懸液OD₆₀₀＝3；

(2)將孢子懸液以一定的接種量加入到含有葡萄糖的共代謝培養基中發酵，即得微生物菌劑。

根據本發明的實施例，步驟(1)PDA固體培養基是通過馬鈴薯200g煮沸30min，加入葡萄糖20g，補充去離子水至1L，自然pH(pH為6-8)。

根據本發明的實施例，還包括加入無機鹽培養基，刮下孢子并過濾除菌絲體，得到孢子懸液。