[發明專利]一種靶向Frizzled7人源化抗體及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202011051875.6
• 申請日: 2019-11-06
• 公開（公告）號: CN112210011A
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發明（設計）人: 解偉;黃鋼;王進;張坤馳;孫吉;張艷;王風仙;趙慧杰;黃燕娟
• 申請（專利權）人: 上海健康醫學院
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;A61K39/395;A61K47/68;A61K51/10;A61P35/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 褚明偉

本發明涉及一種靶向Frizzled7人源化抗體及其制備方法與應用。所述靶向Frizzled7人源化抗體具有重鏈可變區和輕鏈可變區，所述重鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID No.11所示，所述輕鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID No.12所示。本發明的靶向Frizzled7人源化抗體SHH002?hu1保留了鼠源單抗SHH002與重組人Fzd7蛋白的高親和力(KD值均小于1×10^?12M)，與Fzd7特異性結合，且與Fzd家族其他受體沒有交叉反應，降低了抗體在可能的臨床應用中的脫靶風險。SHH002?hu1可以與腫瘤細胞表面Fzd7結合，阻斷Wnt信號通路；并可以與病人腫瘤組織中的Fzd7有效結合，具有潛在的腫瘤靶向性，是未來抗腫瘤治療新的候選藥物。

本申請是分案申請，本分案申請的母案申請日為2019年11月6日，申請號為201911078254.4，發明名稱為“一種靶向Frizzled7人源化抗體及其制備方法與應用”。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其是涉及一種靶向Frizzled7人源化抗體及其制備方法 與應用。

背景技術

Wnt信號通路是一類在物種進化過程中高度保守的信號通路，其在動物胚胎的早期 發育、器官形成和腫瘤的發生發展中，發揮至關重要的作用。Wnt蛋白家族與受體Frizzled (Fzd)的N端胞外結構區CRD(cysteine-rich domain)結合，與Dvl(disheveled)蛋白 相互作用并激活下游信號通路。Fzd蛋白是一類具有七次跨膜分子結構的Wnt受體家族， 該家族中有10個成員蛋白，Frizzled-7(Fzd7)為成員之一。研究表明Wnt受體Fzd7異常表達于不同種類的癌癥中(包括三陰性乳腺癌(TNBC)、非小細胞肺癌(NSCLC)、 肝癌(HCC)等)(Polakis P,2012,EMBO J,31:2737-46；King TD et al,2012,J Cell Biochem,113:13-8)；Fzd7通過激活經典Wnt通路(Wnt/β-catenin)來誘導腫瘤的發生和轉移。

Wnt通路參與腫瘤的侵襲和轉移，且對腫瘤血管生成也有調節作用，對Fzd7進行基因敲除可以顯著抑制腫瘤細胞增殖、移植瘤生長及血管新生。Wnt信號和腫瘤干細胞行為也存在密切聯系，Fzd7就是腫瘤干細胞標記物之一，且這些腫瘤干細胞中Fzd7的上調與 腫瘤化療耐受以及病人的低生存率顯著相關(Barker N et al.,2009,Nature,457:608-11)。另外Fzd7的“context-specific functions”暗示了選擇性靶向Fzd7可以在不影響正常組織穩 態的前提下治療癌癥。綜上，Fzd7是多種腫瘤的潛在治療靶點(Kahn M,2014,Nat RevDrug Discov,13:513-32)。