[發(fā)明專利]一種具有靶向熒光/磁共振雙模態(tài)成像和光熱治療功能的復合納米探針及其制備和應用

有效

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• 申請日: 2020-09-29
• 公開（公告）號: CN112156192B
• 公開（公告）日: 2022-11-25
• 發(fā)明（設計）人: 莊銀蘋;王永;蓋新亭;李夢雙;陳瑩;徐凱;吳長宇;鄭紹輝;李菁菁;韓翠平
• 申請（專利權）人: 徐州醫(yī)科大學
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;A61K49/14;A61K49/18;A61K41/00;A61P35/00;A61P15/14
• 代理公司: 北京淮海知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 32205
• 代理人: 李妮

1.一種具有靶向熒光/磁共振雙模態(tài)成像和光熱治療功能的復合納米探針的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、AuNBP的制備

首先制備金納米晶種，將其加入到生長液中進行AuNBP的生長，然后再對AuNBP進行純化，得到AuNBP納米顆粒；

S2、AuNBP-Gd₂O₃/Au-dBSA納米復合物的制備

首先向濃度為50mg/mL牛血清白蛋白溶液中加入硼氫化鈉，室溫下攪拌1h，得到dBSA，牛血清白蛋白與硼氫化鈉的質(zhì)量比為25~50：1；將反應液置于60~70℃水浴中，繼續(xù)攪拌20~60min，去除過量的硼氫化鈉；將AuNBP納米顆粒分散在上述dBSA溶液中，超聲分散混勻，在劇烈攪拌下依次加入四氯金酸溶液、硝酸釓溶液和氫氧化鈉溶液，37℃下劇烈攪拌12h，得到AuNBP-Gd₂O₃/Au-dBSA納米復合物分散液，對分散液離心并除去上清液，洗滌沉淀，得到AuNBP-Gd₂O₃/Au-dBSA納米復合物；

S3、AuNBP-Gd₂O₃/Au-dBSA表面修飾AS1411適配體

將AuNBP-Gd₂O₃/Au-dBSA納米復合物分散于去離子水中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽、N-羥基琥珀酰亞胺和AS1411適配體，在搖籃床上搖15min，混勻后，放入37℃恒溫水浴箱中反應2h；反應結束后，取出溶液離心，洗滌，得到AuNBP-Gd₂O₃/Au-dBSA-AS1411復合納米探針。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種具有靶向熒光/磁共振雙模態(tài)成像和光熱治療功能的復合納米探針的制備方法，其特征在于，步驟S1中，AuNBP的制備的具體過程是：

S101、Au納米晶種的制備：將0.01M四氯金酸溶液和0.01M檸檬酸三鈉溶液攪拌混勻，劇烈攪拌下快速加入新配制4℃預冷的0.01M硼氫化鈉溶液，2min后停止攪拌，25℃水浴靜置2h，得到Au納米晶種分散液；所述四氯金酸溶液、檸檬酸三鈉溶液、硼氫化鈉溶液的體積比為5：10：6；

S102、AuNBP生長液的制備：取200mL 0.1M十六烷基三甲基溴化銨溶液，邊攪拌邊依次加入10mL 0.01M四氯金酸溶液、2mL 0.01M 硝酸銀溶液、4mL 1M 鹽酸和1.6mL 0.1M抗壞血酸溶液，攪拌混勻，然后在緩慢攪拌下加入1.5~1.8mL步驟S101中的Au納米晶種分散液，繼續(xù)攪拌10s后，25℃下靜置12h；

S103、AuNBP的純化：對AuNBP生長液進行離心，除去上清液，將離心沉淀分散在160mL0.08M十六烷基三甲基氯化銨溶液中，超聲使分散均勻，邊攪拌邊加入32mL 0.01M 硝酸銀溶液和16mL 0.1M 抗壞血酸溶液，65℃恒溫靜置4h使AuNBP表面生長Ag納米棒，然后自然冷卻至室溫；離心除去上清液，離心沉淀分散于160mL 0.05M 十六烷基三甲基溴化銨溶液中，室溫靜置12h，樣品中有沉淀物析出，此沉淀物即為生長有Ag納米棒的AuNBP；除去上部溶液，將沉淀物分散于100mL水中，緩慢攪拌下加入2.5mL氨水和2ml H₂O₂，室溫下靜置以對AuNBP表面的Ag納米棒進行刻蝕；待Ag納米棒被完全刻蝕后即得到AuNBP分散液；對分散液進行離心，除去上清液，收集沉淀，得到AuNBP納米顆粒。

3.根據(jù)權利要求1所述的一種具有靶向熒光/磁共振雙模態(tài)成像和光熱治療功能的復合納米探針的制備方法，其特征在于，步驟S2中，四氯金酸、硝酸釓、氫氧化鈉的摩爾比為0.1：0.05：2。

4.根據(jù)權利要求1所述的一種具有靶向熒光/磁共振雙模態(tài)成像和光熱治療功能的復合納米探針的制備方法，其特征在于，步驟S3中，將AuNBP-Gd₂O₃/Au-dBSA納米復合物分散于去離子水中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽，混勻，37℃恒溫活化15min，再加入N-羥基琥珀酰亞胺和AS1411適配體。