[發(fā)明專利]一種單組份TMB顯色液，其制備方法及試劑盒有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202011044413.1 | 申請(qǐng)日： | 2020-09-28 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN112280824B | 公開(kāi)（公告）日： | 2022-07-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 黃思斯;武子函;季志華;張雨;劉伯華;楊鵬 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 北京森康維特生物技術(shù)研究所 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/28 | 分類號(hào)： | C12Q1/28;G01N33/58;G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京豐浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11781 | 代理人： | 李學(xué)康 |
| 地址： | 101499 北*** | 國(guó)省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 單組份 tmb 顯色 制備 方法 試劑盒 | ||
1.一種單組份TMB顯色液，該顯色液由TMB、過(guò)氧化氫、緩沖液、pH調(diào)節(jié)劑、聚乙烯吡咯烷酮K30、二甲基亞砜、1,2,6-己三醇、硫代硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉和穩(wěn)定劑組成，所述穩(wěn)定劑為甘油和海藻；
每1000mL所述顯色液中含有TMB 0.4 ~ 0.6 g、過(guò)氧化氫400 ~ 600 μL、聚乙烯吡咯烷酮K30 12 ~ 16 g、二甲基亞砜8 ~ 12 mL和1,2,6-己三醇 4 ~ 6 g、硫代硫酸鈉2.5 ~ 3.5mg、乙二胺四乙酸二鈉0.2 ~ 0.3g；
每1000 mL所述顯色液中含有甘油4.5 ~ 5.5 mL，海藻糖9 ~ 10 g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯色液，其特征在于，每1000mL所述顯色液中含有TMB 0.5 g、過(guò)氧化氫500μL、聚乙烯吡咯烷酮K30 14 g、二甲基亞砜10 mL和1,2,6-己三醇 5 g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯色液，其特征在于，所述顯色液的pH值為3.5 ~ 3.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯色液，其特征在于，每1000 mL所述顯色液中含有硫代硫酸鈉3mg。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯色液，其特征在于，每1000 mL所述顯色液中含有乙二胺四乙酸二鈉0.24 g。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯色液，其特征在于， 每1000 mL所述顯色液中含有甘油5mL；每1000 mL所述顯色液中含有海藻糖9.46g。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯色液，其特征在于，所述緩沖液采用醋酸-檸檬酸緩沖液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的顯色液，其特征在于，每1000 mL所述顯色液中含有檸檬酸0.95 ~ 1.05 g和乙酸鈉 8 ~ 8.4 g。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的顯色液，其特征在于，每1000 mL所述顯色液中含有檸檬酸1g和乙酸鈉 8.2 g。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯色液，其特征在于，所述pH調(diào)節(jié)劑選自摩爾濃度為6 ~12mol/L的HCl。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的顯色液，其特征在于，每1000 mL所述顯色液中含有HCl 4 ~9 mL。
12.一種如權(quán)利要求1~11任一項(xiàng)所述顯色液的制備方法，其特征在于，至少包括以下步驟：
S1、按比例量取pH調(diào)節(jié)劑加入水中，得到pH調(diào)節(jié)劑水溶液；按比例稱取TMB溶于二甲基亞砜中，得到TMB溶液；
S2、在所述pH調(diào)節(jié)劑水溶液中按比例加入聚乙烯吡咯烷酮K30，然后加入所述TMB溶液；
S3、再按比例加入1,2,6-己三醇和緩沖液成分，調(diào)節(jié)pH值，加入過(guò)氧化氫，定容，過(guò)濾，即得所述顯色液。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的制備方法，其特征在于，所述pH調(diào)節(jié)劑水溶液的pH值為1.69。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的制備方法，其特征在于，按比例加入硫代硫酸鈉、1,2,6-己三醇、檸檬酸、甘油、海藻糖和乙二胺四乙酸二鈉，用乙酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到3.6后再加入過(guò)氧化氫。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的制備方法，其特征在于，所述乙酸鈉溶液的濃度8 ~ 8.4 g/L。
16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的制備方法，其特征在于，所述乙酸鈉溶液的濃度8.2 g/L。
17.根據(jù)權(quán)利要求12所述的制備方法，其特征在于，所述過(guò)濾為采用0.45 μm的濾器進(jìn)行過(guò)濾。
18.一種酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中含有權(quán)利要求1 ~ 11任一項(xiàng)所述的顯色液。
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