[發明專利]血漿外周血分子標志物hsa-miR-574-5p的應用

在審

• 申請號: 202011042834.0
• 申請日: 2020-09-28
• 公開（公告）號: CN112048553A
• 公開（公告）日: 2020-12-08
• 發明（設計）人: 林紅;廖卉
• 申請（專利權）人: 宜昌市優撫醫院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/113
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 趙紅霞

1.檢測血漿外周血分子標志物hsa-miR-574-5p的制劑在制備雙相障礙的早期識別及臨床時相判斷試劑盒中的應用。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征是，所述分子標志物hsa-miR-574-5p的序列為：5’-UGAGUGUGUGUGUGUGAGUGUGU-3’。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征是，所述試劑盒的相對定量內參標準化體系由hsa-miR-7a-3p組成，其序列為：5’-CUAUACAAUCUACUGUCUUUC-3’。

4.根據權利要求1所述的應用，其特征是，所述試劑盒為實時熒光定量PCR檢測試劑盒。

5.根據權利要求1所述的應用，其特征是，所述分子標志物hsa-miR-574-5p在血漿外周血中的表達與對照中的表達相比被下調。

6.根據權利要求1所述的應用，其特征是，所述試劑盒包括總RNA提取體系、反轉錄體系、擴增體系以及相對定量內參標準化體系。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征是，所述總RNA提取體系包括：2×DenaturingSolution 100μL-625μL，β-巰基乙醇375μL；Wash Solution 2/3500μL，無水乙醇40mL；miRNA Wash Solution 1 350μL，無水乙醇21mL。

8.根據權利要求6所述的應用，其特征是，所述反轉錄體系包括：100mM dNTPs 0.15μL；MultiscribeTM Reverse Transcriptase 1.00μL；10×Reverse Transcription Buffer1.50μL；RNase Inhibitor 0.19μL；DEPC 4.16μL。

9.根據權利要求6所述的應用，其特征是，所述擴增體系包括2×Taqman UniversalPCR buffer,UNG 5μL；20×Taqman MicroRNA Assay Mix 0.5μL；Template 0.75μL；H₂O3.75μL。

10.根據權利要求6所述的應用，其特征是，所述相對定量內參標準化體系具體為：獲取每個反應孔內的熒光信號達到規定的閾值所經歷的循環數，即Ct值，結果取3孔中的平均值，以microRNA-7a-3p為內參，將原始Ct減去內參Ct得出ΔCt，microRNA-547-5p相對表達量為2-ΔCt。