[發明專利]用于辣根過氧化物酶標記抗體的稀釋穩定保護劑，其制備方法及試劑盒

有效

• 申請號: 202011042325.8
• 申請日: 2020-09-28
• 公開（公告）號: CN112285342B
• 公開（公告）日: 2023-09-19
• 發明（設計）人: 武子函;黃思斯;季志華;張雨;劉伯華;楊鵬
• 申請（專利權）人: 北京森康維特生物技術研究所
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/58;G01N33/543
• 代理公司: 北京豐浩知識產權代理事務所(普通合伙) 11781
• 代理人: 李學康

本發明涉及體外檢測領域，具體講，涉及一種用于辣根過氧化物酶標記抗體的稀釋穩定保護劑，其制備方法及試劑盒。該稀釋穩定保護劑中含有緩沖液、防腐劑、3,3',5,5'?四甲基聯苯胺、二甲基亞砜和芳基硼酸。本發明的穩定保護劑用于保存工作濃度的辣根過氧化物酶標記抗體，使工作濃度的辣根過氧化物酶標記抗體可置2～8℃環境下存放，并可長期保持辣根過氧化物酶標記抗體的催化活性以及抗原結合特異性。

技術領域

本發明涉及體外檢測領域，具體講，涉及一種用于辣根過氧化物酶標記抗體的稀釋穩定保護劑，其制備方法及試劑盒。

背景技術

辣根過氧化物酶(HRP)是一種糖蛋白，因辣根中該酶的含量最高而得名，該酶具有比活性高、穩定、分子量小、純酶容易制備等優點，因此被廣泛地用于臨床檢驗中，特別是以該酶為基礎的免疫酶技術在免疫學檢測方面應用更加廣泛。在各種人類及動物疾病的體外快速診斷方法特別是ELISA商品化檢測試劑盒中，酶標抗體特別是辣根過氧化物酶標抗體應用十分廣泛。

酶標抗體一般只能將其原液在在-80℃貯藏且不能反復凍融，其免疫活性才能在貯藏一年時間內不會大量地降低，才能有效地保證診斷方法結果的可靠性。市售的酶標抗體都是制備成高純度的濃縮液或凍干粉，在使用時均需進行幾千倍的大體積稀釋才能進行使用。在臨床應用中頗為不便，如以常規PBS的緩沖液將其稀釋至工作濃度時并不能長期保存，需現配現用，這不但給操作者帶來不便，而且不能保證試劑盒的穩定性。因此，一種可以有效保護工作濃度的酶標抗體在2～8℃或常溫條件下長期保存時效價不會發生改變的稀釋劑就顯得尤為重要。已有研究表明一些保護性蛋白、小分子糖類物質對酶標抗體具有一定的保護性，但效果并不理想；辣根過氧化物酶容易受蛋白水解酶、微生物等的作用而發生水解，同時也容易受其它因素的影響而改變分子構象。

鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的首要發明目的在于提供一種用于辣根過氧化物酶標記抗體的稀釋穩定保護劑。

本發明的第二發明目的在于提供該稀釋穩定保護劑的制備方法。

本發明的第三發明目的在于提供采用該稀釋穩定保護劑的辣根過氧化物酶標記抗體的工作用溶液。

本發明的第四發明目的在于提供采用該稀釋穩定保護劑的試劑盒。

為了完成本發明的發明目的，采用的技術方案為：

本發明涉及一種用于辣根過氧化物酶標記抗體的稀釋穩定保護劑，該稀釋穩定保護劑中含有緩沖液和防腐劑，所述稀釋穩定保護劑中還含有3,3',5,5'-四甲基聯苯胺、二甲基亞砜和芳基硼酸。

可選的，每1000mL所述稀釋穩定保護劑中含有3,3',5,5'-四甲基聯苯胺2～10μM、二甲基亞砜0.2～2mL；優選的，每1000mL所述稀釋穩定保護劑中含有3,3',5,5'-四甲基聯苯胺6μM，二甲基亞砜1.2mL。

可選的，所述芳基硼酸選自4-溴苯硼酸；優選的，每1000mL所述稀釋穩定保護劑中含有芳基硼酸0.5～1.5g，更優選為1g。

可選的，所述稀釋穩定保護劑中還含有蔗糖；優選的，每1000mL所述稀釋穩定保護劑中含有蔗糖10～30g，更優選為20g。

可選的，所述稀釋穩定保護劑中還含有牛血清白蛋白；優選的，每1000mL所述稀釋穩定保護劑中含有牛血清白蛋白0.1～0.3g，更優選為0.2g。

可選的，所述防腐劑選自Proclin-300；優選的，每1000mL所述稀釋穩定保護劑中含有Proclin-300?1～3mL，更優選為2mL。

可選的，所述緩沖液選自PBS緩沖液，pH值為7.2。

本發明還涉及該稀釋穩定保護劑的制備方法，至少包括以下步驟：