[發明專利]一種線粒體靶向牛血清白蛋白@硫化銅納米復合物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202011038494.4
• 申請日: 2020-09-27
• 公開（公告）號: CN112168964A
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發明（設計）人: 夏兵;高燕;童海貝
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K9/14;A61K47/42;A61K47/54;A61P35/00;B82Y5/00
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

本發明公開了一種線粒體靶向牛血清白蛋白@硫化銅納米復合物及其制備方法和應用，屬于納米醫藥技術領域。本發明利用牛血清白蛋白BSA為模板原位合成了硫化銅CuS納米粒子，制得了具有高效近紅外光熱轉換效率的BSA@CuS納米復合物；隨后，將羅丹明110分子與BSA@CuS共價偶聯，構建了R?BSA@CuS納米復合物，可被乳腺癌細胞MCF?7有效地內吞。本申請制備的線粒體靶向的R?BSA@CuS納米復合物與非靶向的BSA@CuS納米復合物相比，在相同的近紅外激光照射下，光熱特性更優良，且R?BSA@CuS納米復合物的抗癌效果顯著增強，在腫瘤光熱治療中具有重要的應用前景。

技術領域

本發明屬于納米醫藥技術領域，具體涉及一種線粒體靶向牛血清白蛋白@ 硫化銅納米復合物及其制備方法和應用。

背景技術

線粒體是真核細胞必不可少的亞細胞器，它通過氧化磷酸化產生大部分細胞能量，并調節其凋亡途徑。線粒體的缺陷或功能失調可導致癌癥的發生、轉移或復發，因此，針對線粒體的特異性治療方法已被開發出來，以提高癌癥治療的療效。在過去的幾十年里，隨著線粒體靶向配體(如親脂性陽離子、肽或適配體)的修飾，多功能納米材料已被構建用于癌癥診斷或治療。特別是高溫引起的熱應激可嚴重干擾高熱敏線粒體的細胞功能或直接破壞線粒體，導致癌細胞凋亡或壞死途徑的激活。與傳統熱療方法相比，光熱納米制劑可有效地將近紅外(NIR)光轉換為熱能，并熱燒蝕腫瘤，同時將對周圍健康組織的損傷降至最低。然而，這些非靶向性光熱納米顆粒被腫瘤細胞內吞后，主要分布在亞細胞胞漿、內含體或溶酶體中，限制了光熱治療的療效。因此，同時具有線粒體靶向和光熱特性的納米復合材料被設計來精確控制它們在線粒體中的特異性富集，然后在近紅外光照射下急劇提高局部溫度，從而顯著提高癌癥光熱療法的療效。這種創新的線粒體靶向光熱療法是一種很有前途的策略，可以更高的效率對抗癌癥。

發明內容

針對現有技術存在的上述問題，本發明所要解決的第一技術問題是提供一種線粒體靶向牛血清白蛋白@硫化銅納米復合物的制備方法；本發明所要解決的第二技術問題是提供上述制備方法所制備的線粒體靶向牛血清白蛋白@硫化銅納米復合物；本發明所要解決的第三技術問題是提供線粒體靶向牛血清白蛋白@硫化銅納米復合物對腫瘤細胞的光熱治療作用以及在制備光熱治療腫瘤藥物中的應用。

為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案如下：

一種線粒體靶向牛血清白蛋白@硫化銅納米復合物的制備方法，包括以下步驟：

1)將牛血清白蛋白BSA溶于去離子水中，然后依次加入CuSO₄、氫氧化鈉和硫化鈉，在80℃～100℃下連續攪拌0.4～0.6h，顏色由棕色變為深綠色，用透析膜MWCO＝12kDa透析制得BSA@CuS納米復合材料；

2)將羅丹明110、NHS和EDC溶解在DMF溶液中，先在黑暗中連續攪拌 3～5h，將所得混合物添加到BSA@CuS納米復合材料分散的水溶液中，然后在黑暗中連續攪拌10～14h，最后用透析膜MWCO＝12kDa透析得到R-BSA@CuS 納米復合物。

進一步的，步驟1)中，牛血清白蛋白BSA用量以去離子水體積計為33.3g/L。

進一步的，步驟1)中，CuSO₄、氫氧化鈉和硫化鈉的摩爾比為2∶5∶4。

進一步的，步驟1)中，在90℃下連續攪拌0.5h。

進一步的，步驟2)中，羅丹明110、NHS和EDC溶解在DMF溶液中的濃度比為70：43：36(w/v)。

進一步的，步驟2)中，先在黑暗中連續攪拌4h，然后在黑暗中連續攪拌 12h。

上述方法制備得到的線粒體靶向牛血清白蛋白@硫化銅納米復合物。