[發(fā)明專利]一種大腸桿菌有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202011038388.6 | 申請(qǐng)日： | 2020-09-28 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN112126612B | 公開（公告）日： | 2023-09-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 蔡宇杰;熊天真;丁彥蕊;白亞軍;鄭曉暉 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 陜西鴻道生物分析科學(xué)技術(shù)研究院有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N1/21 | 分類號(hào)： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/90;C12N15/53;C12P7/42;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇鈺瑩 |
| 地址： | 710000 陜西省西安市*** | 國省代碼： | 陜西;61 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 大腸桿菌 | ||
1.一種基因工程菌，其特征在于，在大腸桿菌染色體的rcsB、mntH、pgi位點(diǎn)上整合3~12個(gè)拷貝數(shù)的L-氨基酸氧化酶，葡萄糖脫氫酶和α-羥基羧酸脫氫酶基因；所述rcsB位于染色體的2316177~2316827處；所述L-氨基酸氧化酶來源于
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述大腸桿菌的宿主為
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基因工程菌，其特征在于，還表達(dá)L-氨基酸氧化酶、葡萄糖脫氫酶和α-羥基羧酸脫氫酶參與的代謝途徑中相關(guān)的基因。
4.一種全細(xì)胞催化劑，其特征在于，含有權(quán)利要求1~3任一所述的基因工程菌；將所述基因工程菌接種于培養(yǎng)體系中，于22~30℃培養(yǎng)不少于16?h后，收集得到全細(xì)胞催化劑。
5.一種生產(chǎn)丹參素或苯乳酸的方法，其特征在于，
以L-多巴為底物，應(yīng)用權(quán)利要求4所述的全細(xì)胞催化劑進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化制備得到丹參素；
以L-苯丙氨酸為底物，應(yīng)用權(quán)利要求4所述的全細(xì)胞催化劑進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化制備得到苯乳酸。
6.一種構(gòu)建權(quán)利要求1~3任一所述基因工程菌的方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）構(gòu)建L-氨基酸氧化酶，葡萄糖脫氫酶和α-羥基羧酸脫氫酶基因整合框；所述整合框?yàn)椋赫衔稽c(diǎn)左臂-?L-氨基酸氧化酶基因，葡萄糖脫氫酶基因，α-羥基羧酸脫氫酶基因-整合位點(diǎn)右臂；所述整合位點(diǎn)為rcsB、mntH、pgi；
（2）將步驟（1）構(gòu)建的L-氨基酸氧化酶，葡萄糖脫氫酶和α-羥基羧酸脫氫酶基因整合框轉(zhuǎn)化至大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞中。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，步驟（2）所述大腸桿菌為
8.權(quán)利要求1~3任一所述基因工程菌，或權(quán)利要求4所述全細(xì)胞催化劑在食品、生物領(lǐng)域參與氨基酸為底物反應(yīng)中的應(yīng)用。
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