[發(fā)明專利]一種檢測紡織品中膠原蛋白含量的測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011035715.2
• 申請日: 2020-09-27
• 公開（公告）號: CN112198252B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發(fā)明（設計）人: 韓瑩瑩;趙海浪;譚玉靜;莊園園
• 申請（專利權）人: 上海市質量監(jiān)督檢驗技術研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/24;G01N30/86
• 代理公司: 上海世圓知識產(chǎn)權代理有限公司 31320
• 代理人: 王佳妮;顧俊超

1.一種檢測紡織品中膠原蛋白含量的測定方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）向試樣中加入稀硫酸，在105～120℃下恒溫水解14～20h，過濾獲得水解液；向所述水解液中加入稀堿溶液中和至pH=6～8并定容；取適量定容溶液用0.20～0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為前處理試液；所述稀硫酸的摩爾濃度為2.0～3.2mol/L；

（2）采用9-芴甲基氯甲酸酯和鄰苯二甲醛對所述前處理試液進行柱前在線衍生化處理，得到待測試液；

（3）將所述待測試液注入高效液相色譜儀中測定羥脯氨酸及其峰面積，根據(jù)標準曲線方程計算得到待測樣品中羥脯氨酸的含量；

所述高效液相色譜儀的色譜柱為Agilent Poroshell HPH-C18，4.6x100 mm，2.7μm；檢測器為FLD熒光檢測器，其檢測條件為：激發(fā)波長266nm，發(fā)射波長305nm；梯度洗脫的流動相由流動相A和流動相B組成，其中流動相A為含8～15mmol/L磷酸氫二鈉和8～15mmol/L硼酸鈉的緩沖溶液，流動相B為體積比（42～48）:（42～48）:10的甲醇、乙腈和水的混合溶液；所述梯度洗脫的程序為：0～0.35min，B：2%；0.35～13.40min，B：57%；13.40～15.70min，B：100%；15.70～18.00min，B：2%。

2.根據(jù)權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述試樣為將紡織品樣品剪碎成不大于5mm×5mm的碎片。

3.根據(jù)權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述稀堿溶液為摩爾濃度為0.5～7.5mol/L的NaOH水溶液或摩爾濃度為0.5～7.5mol/L的KOH水溶液。

4.根據(jù)權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述高效液相色譜儀的柱溫：30～50℃，以1.3～1.6mL/min的流速進行梯度洗脫。

5.根據(jù)權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述標準曲線方程的制作過程為：準確稱取適量羥脯氨酸標準品，采用稀HCl溶液超聲溶解后定容，再稀釋成一系列梯度標準工作溶液；將所述梯度標準工作溶液注入高效液相色譜儀中測定羥脯氨酸及其峰面積，以濃度為橫坐標、羥脯氨酸的峰面積為縱坐標，繪制標準工作曲線，計算得到標準曲線方程。