[發明專利]Caspase-1在制備提高CAR-T治療效果的藥物中的應用

在審

• 申請號: 202011027619.3
• 申請日: 2020-09-25
• 公開（公告）號: CN112067806A
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發明（設計）人: 劉丹;戴玉蓮;鄭駿年;施明;徐溪悅;趙璇;李思瑾;馬文
• 申請（專利權）人: 徐州醫科大學
• 主分類號: G01N33/573
• 分類號: G01N33/573;C12Q1/6886;A61K45/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 朱萍;孟祥斌

本發明公開了Caspase?1在制備提高CAR?T治療效果的藥物中的應用。本發明通過細胞實驗證明了抑制Caspase?1的表達和/或活性可顯著減少CAR?T治療引發的IL?1β釋放，證明Caspase?1在CAR?T治療誘導的巨噬細胞IL?1β釋放中發揮著重要作用。Caspase?1的應用為提高CAR?T治療效果、緩解其毒副作用提供了理論基礎和新思路。

技術領域

本發明屬于生物醫藥與分子生物學領域，涉及Caspase-1在制備提高CAR-T治療效果的藥物中的應用。

背景技術

全球每年因惡性腫瘤死亡人數為8927.4萬人，成為僅次于心腦血管疾病的第二大死因。目前，惡性腫瘤的治療方法主要有手術、化療、放療等多種手段，各種治療手段均可取得一定治療效果，但也都存在不足或缺點。腫瘤免疫學治療作為一種新興療法，現已發展成為繼手術、化療和放療之后的第四種腫瘤治療模式。近年來腫瘤免疫治療發展迅速，根據不同的作用機制，腫瘤免疫治療藥物分為六類：靶向T細胞免疫調節劑、其他免疫調節劑、腫瘤疫苗、細胞療法、溶瘤病毒、CD3靶向雙特異性抗體等。腫瘤免疫治療的嵌合抗原受體T細胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，CAR-T)由胞外抗原結合區(由來源于單克隆抗體的輕鏈(VL)和重鏈(VH)組成，中間由帶韌性的鉸鏈區連接形成單鏈抗體、跨膜區域和胞內信號轉導區組成。CAR-T療法是應用患者自身的T淋巴細胞，經過實驗室重新改造，裝載上具有識別腫瘤抗原的受體及共刺激分子，體外擴增后再次回輸入患者體內，從而識別并攻擊自身的腫瘤細胞。CART細胞療法對于血液瘤療效顯著，2017年8月，美國食品藥品監督管理局(FDA)批準上市全球首個用于治療25歲以下復發難治性急性B淋巴細胞白血病(r/rBALL)的靶向CD19的CAR-T藥物(商品名:Kymriah)。同年10月，治療復發難治性大B細胞淋巴瘤(r/rLBCL)的CAR-T藥物(商品名:Yescarta)獲得批準上市。這兩種CAR-T療法藥物的上市標志著細胞治療時代的到來。

隨著CAR-T療法研究的深入，其局限性也逐漸凸顯。CAR-T細胞在識別殺傷腫瘤細胞時，其單鏈可變片段(scFv)與靶抗原相互接觸，在胞內CD3結構以及共刺激分子雙重信號的激活下，CAR-T細胞在短時間內大量增殖活化，同時分泌大量免疫刺激細胞因子如IFN-γ、TNF-α和IL-2等，此外，在CAR-T細胞分泌細胞因子的刺激以及與靶細胞直接接觸的作用下，可以活化巨噬細胞并誘導其釋放高水平的促炎細胞因子，如IL-6、IL-1β以及TNF-α等，由此引發CAR-T治療后嚴重的毒副作用，即細胞因子風暴或細胞因子釋放綜合征(CRS)和神經毒性。目前，最新的研究證明，CAR-T治療引發的CRS主要是由巨噬細胞釋放的IL-6、IL-1和NO介導的，并且阻斷IL-1的作用，能在有效控制CRS的同時緩解神經毒性，IL-1因此被確定為治療CRS的新靶點。本申請通過對CAR-T細胞治療引發巨噬細胞釋放IL-1β的機制的研究，發現Caspase-1抑制劑可顯著抑制共培養誘導的培養上清液中IL-1β的增加。目前，Caspase-1在制備提高CAR-T治療效果的藥物中的應用未見報道，這一發明為提高CAR-T治療效果、緩解其毒副作用提供了新思路。

發明內容

本發明的目的是提供一種Caspase-1在制備提高CAR-T治療效果的藥物中的應用，為提高CAR-T治療效果、緩解CAR-T治療的毒副作用提供了理論基礎和新思路。

本發明的上述目的通過以下技術方案得以實現：

本發明的第一方面提供了Caspase-1在制備提高CAR-T治療效果的藥物中的應用。

進一步，所述藥物包括抑制Caspase-1表達和/或活性的試劑。

本發明的第二方面提供了一種抑制Caspase-1表達和/或活性的試劑。

進一步，所述試劑選自以下組：

(1)干擾Caspase-1表達的干擾RNA或其前體；