[發明專利]一種L-苯丙氨酸的生產方法

有效

• 申請號: 202011026237.9
• 申請日: 2020-09-25
• 公開（公告）號: CN112251476B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發明（設計）人: 徐慶陽;陳志超;李燕軍;張成林;馬倩;范曉光;謝希賢;陳寧
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12P13/22
• 分類號: C12P13/22;C12N1/20;C12R1/19
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 李蕊

1.一種L-苯丙氨酸的生產方法，其特征在于：具體步驟包括：菌種活化、種子培養和發酵培養，其中，采用的發酵培養基中維生素H濃度為0.5mg/L，采用消泡劑作為表面活性劑，所述消泡劑的HLB值范圍為1-3，消泡劑添加量為1‰-6‰、添加時間為L-苯丙氨酸即將達到結晶濃度時；所述發酵培養采用全營養流加發酵工藝，將發酵培養基分為底物發酵培養基與濃縮流加培養基，具體為配制3L發酵用量的發酵培養基定容至600mL，取200mL加水定容至2.6L作為底物發酵培養基，剩余400mL作為濃縮流加培養基；所述發酵培養基成分為MgSO₄·7H₂O 1.5g/L，酵母粉3g/L，蛋白胨1g/L，硫酸銨2g/L，檸檬酸1g/L，K₂HPO₄·3H₂O 6g/L，酪氨酸2g/L，谷氨酸1g/L，FeSO₄·7H₂O 20mg/L，MnSO₄ 10mg/L，VB混合液2mL/L，微量元素混合液1.5mL/L，卡那霉素10mg/L。

2.根據權利要求1所述的L-苯丙氨酸的生產方法，其特征在于：所述消泡劑為聚醚性消泡劑或有機硅消泡劑。

3.根據權利要求1所述的L-苯丙氨酸的生產方法，其特征在于：所述消泡劑添加量為4‰。

4.根據權利要求1所述的L-苯丙氨酸的生產方法，其特征在于：所述結晶濃度為47g/L。

5.根據權利要求1所述的L-苯丙氨酸的生產方法，其特征在于：所述菌種活化所用培養基成分為:葡萄糖5g/L，酵母粉4g/L，蛋白胨10g/L，K₂HPO₄.3H₂O 1g/L，酪氨酸1g/L，瓊脂粉25g/L；所述種子培養所用培養基成分為:葡萄糖30g/L，酵母粉6g/L，蛋白胨1g/L，檸檬酸1.5g/L，MgSO₄.7H₂O 1.5g/L，KH₂PO₄ 2.0g/L，硫酸銨2.0g/L，V_B1 1mg/L，FeSO₄.7H₂O 10mg/L，MnSO₄.H₂O 5mg/L，維生素H 1mg/L，酪氨酸3g/L，卡那霉素20mg/L。

6.根據權利要求1所述的L-苯丙氨酸的生產方法，其特征在于：發酵過程還包括額外的酪氨酸流加，所述酪氨酸流加方式為隨葡萄糖流加，方法為將酪氨酸用氫氧化鈉溶液溶解后單獨裝瓶，并與流加葡萄糖分開滅菌，待流加葡萄糖與酪氨酸均冷卻至室溫后混勻。

7.根據權利要求6所述的L-苯丙氨酸的生產方法，其特征在于：流加葡萄糖為發酵所需主要碳源，發酵期間采用葡萄糖亞適量控制工藝，根據罐內殘糖濃度確定流加速度，且殘糖濃度＜2。

8.根據權利要求1所述的L-苯丙氨酸的生產方法，其特征在于：所述濃縮流加培養基開始流加時間為發酵2h，流加結束時間為發酵32h；2-7h流加速度為13mL/h，7-12h流加速度為14mL/h，12-22h流加速度為15mL/h，22-27h流加速度為13mL/h，27-32h流加速度為10mL/h。