[發(fā)明專利]綠針假單胞菌QOHPHZ-3作為1-羥基-吩嗪生產工程菌株的應用

有效

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• 申請日: 2020-09-25
• 公開（公告）號: CN112195144B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發(fā)明（設計）人: 劉開泉;王瑞明;李玲;王騰飛;李丕武
• 申請（專利權）人: 齊魯工業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/31;C12N15/54;C12P17/12;C12R1/38
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 李箏

本發(fā)明具體涉及綠針假單胞菌作為1?羥基吩嗪生產工程菌株的應用。綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)Qlu?1是一株篩選自濰坊蔬菜大棚菜椒根際的綠針假單胞菌，經測序得知該菌株含有吩嗪合成典型基因簇phzABCDEFG，以及吩嗪類的修飾基因phzO，可以產生吩嗪?1?羧酸以及2?羥基吩嗪。在前期的研究中，本發(fā)明利用來自銅綠假單胞菌中的phzS替換phzO獲得的QOHPHZ?1，檢測得知獲得了1?OH?PHZ的積累，最高產量在20mg/L左右，為了進一步提高菌株的產能，本發(fā)明針對該菌株QOHPHZ?1進一步進行了優(yōu)化，獲得的1?OH?PHZ高產菌株，有望作為工程菌株進行應用。

技術領域

本發(fā)明屬于微生物工程菌株構建技術領域，具體涉及一種生產1-羥基-吩嗪的綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)QOHPHZ-1、綠針假單胞菌(Pseudomonaschlororaphis)QOHPHZ-2、綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)QOHPHZ-3，以及上述菌株作為工程菌株在農業(yè)生產領域的應用。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

生物農藥是指利用生物產生的天然活性物質、衍生物或生物活體本身制備的農藥。隨著社會的生態(tài)意識加強，化學農藥帶來的環(huán)境污染問題得到了更加廣泛的關注，生物農藥由于具有環(huán)境友好等特點得到快速發(fā)展，有望成為未來農藥生產領域的重要發(fā)展方向。

目前研究最為廣泛的生物農藥主要是微生物農藥(以微生物活菌制劑為主體)和農用抗生素；微生物農藥按照所利用的微生物資源可分為細菌類、真菌類和病毒類等。用作微生物農藥的細菌主要有芽孢桿菌屬、鏈霉菌屬、假單胞菌屬等，已有很多具有優(yōu)異生防性能的細菌菌株被分離出來，例如采用放射農桿菌K84防治植物冠癭病。目前也有芽抱桿菌被制作成商品制劑，例如AgraQuest公司利用短小芽孢桿菌QST2808生產了活菌制劑SONATA，它能有效控制鏈格孢屬及葡萄孢屬等真菌引起的植物疾病；還有利用解淀粉芽抱桿菌QST713菌株制備的菌劑SerenadeOpti，以及Novozymes公司的產品Taegro(含枯草芽抱桿菌，用于防治由鐮刀菌屬和絲核菌屬引起的根腐病和枯萎病)。另外，國內的研究人員也對具有生物防治潛力的芽抱桿菌進行了廣泛研究，如，韓艷霞與童蘊慧等人成功的實現了應用蠟狀芽孢桿菌B3-7和地衣芽抱桿菌W10防治小麥全蝕病和西紅柿灰霉病。陳志誼等利用枯草芽抱桿菌B-916開發(fā)了生物農藥“紋曲寧”用于防治水稻紋枯病及偽黑穗病等。另外，許多假單胞菌因能產生多種抗菌物質也常用作微生物農藥，這些抗菌物質包括嗜鐵素、硝毗咯菌素、申嗪霉素、綠膿菌素、1-羥基吩嗪(1-OH-PHZ)等。其中，1-OH-PHZ具有較好的生防功能，而且在田間可降解，有比較好的應用前景。

基于發(fā)明人以往的研究結果，綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)含有吩嗪類物質合成的核心基因部件及吩嗪類相關修飾基因，并且綠針假單胞菌(Pseudomonaschlororaphis)本身致病性低，使用安全。由于1-OH-PHZ化學合成途徑較少，基于微生物獲得一種高產1-OH-PHZ的工程菌株具有重要意義。

發(fā)明內容