[發(fā)明專利]環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的突變體、編碼所述突變體的基因、重組載體及制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011022141.5
• 申請日: 2020-09-25
• 公開（公告）號: CN112094831B
• 公開（公告）日: 2021-12-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳龍軍;陳濟琛;賈憲波;林陳強;方宇;張慧
• 申請（專利權(quán)）人: 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12P19/04;C12P19/18
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 瞿曉晶

1.環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的突變體，所述突變體為L624K、Q626S、N651T、L624K/N651T、Q626S/N651T、L624K/Q626S和L624K/Q626S/N651T中的一種或幾種；

環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的第624位的亮氨酸突變?yōu)橘嚢彼岬玫酵蛔凅wL624K；

環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的第626位的谷氨酰胺突變?yōu)榻z氨酸得到突變體Q626S；

環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的第651位的天冬酰胺突變?yōu)樘K氨酸得到突變體N651T；

環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的第624位的亮氨酸突變?yōu)橘嚢彼幔业?51位的天冬酰胺突變?yōu)樘K氨酸得到突變體L624K/N651T；

環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的第626位的谷氨氨酸突變?yōu)榻z氨酸，且第651位的天冬酰胺突變?yōu)樘K氨酸得到突變體Q626S/N651T；

環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的第624位的亮氨酸突變?yōu)橘嚢彼幔业?26位的谷氨氨酸突變?yōu)榻z氨酸得到突變體L624K/Q626S；

環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的第624位的亮氨酸突變?yōu)橘嚢彼帷⒌?26位的谷氨氨酸突變?yōu)榻z氨酸且第651位的天冬酰胺突變?yōu)樘K氨酸得到突變體L624K/Q626S/N651T；

所述環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.編碼權(quán)利要求1所述突變體的基因。

3.包含權(quán)利要求2所述基因的重組質(zhì)粒。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的重組質(zhì)粒，其特征在于，所述重組質(zhì)粒的骨架質(zhì)粒選自pUC系列或pET系列。

5.包含權(quán)利要求3或4所述重組質(zhì)粒的重組細胞。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的重組細胞，其特征在于，所述重組細胞的宿主細胞為細菌細胞或真菌細胞。

7.權(quán)利要求1所述突變體的制備方法，包括以下步驟：

對權(quán)利要求5或6所述重組細胞進行發(fā)酵培養(yǎng)，得到發(fā)酵液，對所述發(fā)酵液進行離心，收集上清液，所述上清液中含有環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶突變體。

8.權(quán)利要求1所述突變體或者權(quán)利要求2所述基因或者權(quán)利要求3或4所述重組質(zhì)粒或者權(quán)利要求5或6所述重組細胞在制備環(huán)糊精中的應(yīng)用。