[發明專利]一種可作為胃癌診斷標志物的lncRNA及其應用

在審

• 申請號: 202011014091.6
• 申請日: 2020-09-24
• 公開（公告）號: CN112143808A
• 公開（公告）日: 2020-12-29
• 發明（設計）人: 陳璇;柴可群;費寶瑩;吳人照;余志紅;朱佳杰;任澤明;童曄玲;陳思思;薛曉敏;李毓
• 申請（專利權）人: 浙江省中醫藥研究院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/113;C12N15/11
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 沈金龍

1.一種可作為胃癌診斷標志物的lncRNA，命名為lncRNA SC1，序列如SEQ ID No.1所示。

2.如權利要求1所述的lncRNA在作為大鼠胃癌模型中胃癌診斷標志物中的應用。

3.如權利要求1所述的lncRNA在篩選胃癌治療藥物中的應用。

4.一種用于檢測權利要求1所述lncRNA的引物對，包括上游引物和下游引物，上游引物：5'-GTGTCCAGTGTGCGGTACAGC-3'；下游引物：5'-GGAGCTTGGCGAATCCAGTGC-3'，

使用時先提取待檢測樣品的總RNA，再逆轉錄合成cDNA，然后以合成的cDNA為模板、用所述引物對進行擴增來判斷待檢測樣品中是否含有所述lncRNA。

5.一種用于檢測權利要求1所述lncRNA的試劑盒，其特征在于，包含如權利要求4所述的引物對。

6.一種非疾病診斷為目的的、用于大鼠胃癌模型輔助判斷的檢測權利要求1所述lncRNA的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)提取待測胃癌胃部組織和正常胃組織的總RNA，逆轉錄合成cDNA；

(2)以cDNA為模板，利用權利要求4所述引物對進行實時熒光定量PCR檢測；

(3)采用相對定量法計算所述LncRNA的表達量。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，實時熒光定量PCR檢測的反應體系為20μLPCR反應體系為：2×聚合酶鏈反應預混液11μL，cDNA模板1μL，10μM上游引物1μL，10μM下游引物1μL，無RNA酶水7μL，其中，2×聚合酶鏈反應預混液包括2.5U Taq DNA聚合酶，1.5mmol/L MgCl₂，100μmol/L dNTPs和2.0mmol/L SYBR Green I。

8.如權利要求6所述的方法，其特征在于，PCR反應條件為：先95℃預變性30秒；然后95℃變性5秒，60℃退火和延伸34秒，共40個循環。