[發(fā)明專利]一種能夠特異性識別并靶向S.aureus菌的抗菌肽

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• 申請日: 2020-09-24
• 公開（公告）號: CN112321680A
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發(fā)明（設計）人: 周國才
• 申請（專利權）人: 南京斯泰爾醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/04;C07K1/06;C07K1/16;A61K38/10;A61P31/04
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本發(fā)明屬于抗菌材料技術領域，具體公開了一種能夠特異性識別并靶向S.aureus菌的抗菌肽的合成及其抗菌研究。該序列通過常規(guī)的Fmoc多肽固相合成法合成，在多肽序列中GLFVD為S.aureus菌靶向多肽，能夠特異性靶向S.aureus菌，GKRWWKWWRR為廣譜的抗菌肽序列，對S.aureus菌和E.coli菌都具有抗菌效果，將二者合二為一得到的目標抗菌肽（GLFVDGKRWWKWWRR）能夠特異性靶向S.aureus菌，且對S.aureus菌有著優(yōu)異的抗菌效果。抗菌肽（GLFVDGKRWWKWWRR）與傳統(tǒng)抗菌肽相比具有靶向性能，在選擇性殺菌領域具有廣泛的應用前景。

技術領域

本發(fā)明屬于抗菌材料技術領域，具體涉及一種能夠特異性識別并靶向S. aureus菌的抗菌肽的制備及其抗菌效果研究。

技術背景

耐藥菌感染的危機日益嚴重，以及新的小分子抗生素研發(fā)的持續(xù)缺乏，開發(fā)新型抗菌材料已經(jīng)越來越受到重視。在抗多重耐藥性病原體（MDR）的斗爭中，抗菌肽（antimicrobial peptide，AMP）因其具有抗菌范圍廣、活性高、種類多等優(yōu)點，成為一種炙手可熱的新型抗菌藥物，并有望成為傳統(tǒng)抗生素的理想替代品，具有廣闊的應用前景。

大多數(shù)抗菌肽都是中小型的，并且具有較多的堿性殘基，例如賴氨酸和精氨酸，使它們在生理pH下帶正電荷。細菌膜的破碎或完全裂解是最被普遍接受的機制。細菌膜裂解的性質與抗菌肽的凈正電荷和兩親性結構有關。細菌細胞膜的外部小葉中存在帶負電荷的分子，例如脂多糖和脂蛋白酸，哺乳動物的細胞膜中占主導地位是兩性離子磷脂、鞘磷脂和膽固醇，而抗菌肽會特異性吸引膜上的負電荷，因此細菌和真核細胞之間膜成分的差異使得抗菌肽對細菌具有選擇性。

然而，目前大多抗菌肽沒有靶向性，本發(fā)明的目的在于制備一種可特異性識別并靶向S. aureus菌的抗菌肽，當S. aureus菌與E.coli菌同時存在的情況下，能夠特異性殺死S.aureus菌。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術中存在的不足，本發(fā)明提供了一種能夠特異性識別并具有靶向作用的抗菌肽用于選擇性殺滅S. aureus菌，在選擇性殺菌領域具有廣泛的應用前景。

本發(fā)明的具體技術方案如下所述：

1、本發(fā)明合成的抗菌肽，其序列為GLFVDGKRWWKWWRR，該肽鏈采用常規(guī)的Fmoc多肽固相合成法合成，即固相樹脂上被Fmoc保護的單體氨基酸去保護后露出氨基，通過縮合反應與溶液中氨基酸的羧基形成肽鍵，從而將氨基酸連接到樹脂上，使肽鏈從C端向N端延伸，直至合成所需肽鏈。

2、本發(fā)明合成的抗菌肽均經(jīng)過HPLC純化，型號為Agilent 1260，純化后只出現(xiàn)目標單峰，純化效果較好。

3、本發(fā)明合成的抗菌肽（GLFVDGKRWWKWWRR），其中GLFVD為S. aureus菌的靶向多肽，能夠特異性靶向S. aureus菌，GKRWWKWWRR為廣譜的抗菌肽序列，對S. aureus菌和E.coli菌都具有抗菌效果，且MIC90均為12μM。

4、本發(fā)明合成的抗菌肽（GLFVDGKRWWKWWRR）能夠特異性殺滅S. aureus菌。當GLFVDGKRWWKWWRR的濃度為14μM時，S. aureus的存活率僅為2.8%，即MIC90為14μM，而加入GLFVDGKRWWKWWRR的終濃度為40μM時，仍然有9.4%的E.coli存活，說明GLFVDGKRWWKWWRR序列能夠特異性識別并靶向S. aureus菌。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有以下有益效果：