[發明專利]一種土壤有效硒的提取及測定方法

在審

• 申請號: 202011013530.1
• 申請日: 2020-09-24
• 公開（公告）號: CN114252308A
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發明（設計）人: 宋佳平;王張民;尹雪斌;劉志奎;張澤洲;林錦鈺;王曉麗
• 申請（專利權）人: 中國科學技術大學蘇州研究院
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/40;G01N21/64
• 代理公司: 北京匯澤知識產權代理有限公司 11228
• 代理人: 張瑾

本發明公開了一種土壤有效硒的提取及測定方法。所述土壤有效硒的提取方法包括以下步驟：使用土壤樣品風干、研磨過篩；使用EDTA?2Na作為浸提劑震蕩提取有效硒，離心取含硒上清液。測定含硒上清液中的硒含量，取上清液經濃硝酸及高氯酸消解后梯度加熱至冒白煙，再冷卻至室溫；加入濃鹽酸后搖勻放置反應，得到還原液的進入原子熒光分光光度計檢測硒含量，計算得到土壤有效硒含量。本發明提出的土壤有效硒提取及測定方法，提取出的硒與植物中的硒含量相關性良好，且提取過程簡單，適用范圍廣，分析成本低，可用于各種土壤有效硒提取及測定。

技術領域

本發明涉及分析檢測技術領域，具體指一種土壤有效硒的提取及測定方法。

背景技術

硒是人體必需的微量元素之一，缺乏或過量都會引起許多疾病。土壤中的硒含量在地殼表面呈明顯的地帶性分布，分布極不均勻。相關研究表明，全世界范圍內絕大多數土壤硒含量在0.01～2.0mg/kg之間，平均值為0.4mg/kg。植物是人類補硒的主要來源，植物對硒的吸收與土壤中硒的形態有直接關系。硒在土壤中存在的形態有水溶態、可交換態、礦質結合態、有機結合態和殘渣態，其各種硒形態的總和稱為總硒，其中能直接被作物吸收利用的稱為生物有效硒。大量的研究報道表明，作物含硒量與土壤總硒沒有顯著的相關性，而與土壤有效硒相關性顯著。用生物有效態硒來反映土壤供硒能力更準確，因此研究土壤中有效態硒的檢測方法對闡明硒的生物可利用性甚至整個生態環境具有重要的理論和實踐意義。

關于土壤有效硒的研究，目前尚沒有統一的測定方法，常用連續浸提或單一浸提的化學法，提取劑有水、CaCl₂、NaHCO₃、K₂SO₄、KH₂PO₄和磷酸緩沖液等，需根據土壤類型及酸堿性來選取不同的浸提劑，對不同類型土壤有效硒的浸提尚未形成共識，提取和測定有效硒含量的準確性較低，且操作較為復雜。

發明內容

本發明的目的之一是提供一種土壤有效硒的提取方法，以解決現有技術存在的相關問題。

本發明提供的土壤有效硒的提取方法，使用EDTA(乙二胺四乙酸)作為浸提劑，具體包括以下步驟：

(1)將土壤樣品風干、研磨，過篩網，得到土壤樣品；

(2)稱取土壤樣品1.00～1.50g置于15mL離心管中，加入EDTA作為浸提液；

(3)將裝有土壤樣品和浸提液的離心管放入恒溫振蕩器，震蕩浸提；

(4)將步驟(3)得到的混合液體離心，得到含硒上清液，由此完成土壤有效硒的提取。

優選地，如上所述的土壤有效硒的提取方法，步驟(1)中土壤樣品所過篩網為100～200目；

優先地，如上所述的土壤有效硒的提取方法，步驟(2)中所用EDTA提取液為0.05mol/L的EDTA-2Na(乙二胺四乙酸二鈉)提取液；

優選地，如上所述的土壤有效硒的提取方法，步驟(2)中所用EDTA-2Na提取液體積為10mL；

優選地，如上所述土壤有效硒的提取方法，步驟(3)中浸提條件為30℃，200～300r/min，提取時間為30～90min；

優選地，如上所述的土壤有效硒的提取方法，步驟(4)中離心轉速為2000～3000r/min，離心時間為10分鐘。

本發明的另一目的是提供一種土壤有效硒含量的測定方法。所述土壤有效硒含量的測定方法，包括本發明土壤有效硒的提取方法中(1)-(4)的步驟，還包括以下步驟：

(5)取含硒上清液1mL加入錐形瓶，加酸消解6-12h；

(6)將錐形瓶放在電熱板上梯度加熱至冒白煙，取下冷卻至室溫；