[發明專利]一株嗜吡啶紅球菌及其在生產PHBV中的應用

有效

• 申請號: 202011012430.7
• 申請日: 2020-09-24
• 公開（公告）號: CN112063567B
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發明（設計）人: 郭文斌;邵宗澤
• 申請（專利權）人: 自然資源部第三海洋研究所;中國大洋礦產資源研究開發協會（中國大洋事務管理局）
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/62;C12R1/01
• 代理公司: 廈門市寬信知識產權代理有限公司 35246
• 代理人: 巫麗青;寧霞光

1.一株嗜吡啶紅球菌,其特征在于，所述嗜吡啶紅球菌命名為嗜吡啶紅球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23，在中國典型培養物保藏中心登記保藏，保藏號為CCTCC NO：M2019609。

2.根據權利要求1所述一株嗜吡啶紅球菌,其特征在于，所述菌的16S rDNA序列如SEQID NO：1所示。

3.如權利要求1所述嗜吡啶紅球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23在生產PHBV中的應用，所述PHBV為3-羥基丁酸和3-羥基戊酸的共聚物。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述PHBV的合成底物為對苯二甲酸和/或對苯二甲酸鹽。

5. 一種制備PHBV的方法，其特征在于，包括以下步驟：發酵培養如權利要求1所述嗜吡啶紅球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23，分離純化PHBV。

6.根據權利要求5所述一種制備PHBV的方法，其特征在于，制備PHBV的方法中，發酵溫度為25-40℃；發酵體系的pH值為6.0- 9.0；發酵體系溶解氧為20%- 100%，發酵時間為24-96 小時。

7.根據權利要求5或6所述一種制備PHBV的方法，其特征在于，所述發酵培養嗜吡啶紅球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23的方法為：

（1）將嗜吡啶紅球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23接入種子培養基進行發酵培養；

（2）將步驟（1）中的種子轉接到發酵培養基中進行發酵培養。

8.根據權利要求7所述一種制備PHBV的方法，其特征在于，所述步驟（1）中的種子培養基為2216E培養基，每升含蛋白胨5.0g，酵母粉1.0g，檸檬酸鐵 0.1g，氯化鈉 19.45g，氯化鎂5.98g，硫酸鈉3.24g，氯化鈣1.8g，氯化鉀0.55g，碳酸鈉0.16g，溴化鉀0.08g，氯化鍶0.034g，硼酸0.022g，硅酸鈉0.004g，氟化鈉0.0024g，硝酸鈉0.0016g，磷酸氫二鈉0.008g，用水定容至1升，pH值7.6±0.2；和/或，

所述步驟（2）中的發酵培養基由氯化鈉5.0- 50.0 g，六水合氯化鎂1.0- 10.0 g，氯化鈣0.1- 2.0 g，硫酸鈉0.5- 5.0 g，氯化銨0.1- 5.0 g，磷酸二氫鉀0.1- 20.0 g，氯化鉀0.5- 10.0 g，微量元素0.5- 3.0毫升，對苯二甲酸和/或對苯二甲酸鹽5.0- 30.0 g和水組成，用水定容至1升；和/或，

所述步驟（2）中步驟（1）培養的種子以1%的接種量轉接到發酵培養基中。

9.根據權利要求8所述一種制備PHBV的方法，其特征在于，所述微量元素按如下方法制備：將乙二胺四乙酸1.0- 10.0 g，硼酸2.0- 50.0 mg，四水合氯化錳2.0- 50.0 mg，七水合硫酸亞鐵1.0- 5.0 g，六水合氯化鈷100.0- 1000.0 mg，六水合氯化鎳10.0- 100.0 mg，二水合氯化銅2.0- 50.0 mg，七水合硫酸鋅2.0- 50.0 mg，二水合鉬酸鈉2.0- 50.0 mg和0.5mol/L的鹽酸水溶液混合，用0.5 mol/L的鹽酸水溶液補足至1升。

10.根據權利要求5或6所述一種制備PHBV的方法，其特征在于，所述分離純化PHBV的方法是發酵結束后離心獲得菌體，冷凍干燥菌體后利用氯仿進行抽提，過濾菌體后旋轉蒸發濃縮，利用冷甲醇進行沉淀獲得PHBV。