[發(fā)明專利]快速高效檢測雪峰蟲草不同菌株交配型的方法及引物組

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011010396.X
• 申請(qǐng)日: 2020-09-23
• 公開（公告）號(hào): CN112226530A
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄒娟;甘雨萱;李文潔;李婷;劉勝貴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 懷化學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12N15/11
• 代理公司: 深圳市興科達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44260
• 代理人: 桂艷球

1.一種引物組，其特征在于，包括雪峰蟲草MAT1-1交配型引物組和雪峰蟲草MAT1-2交配型引物組；雪峰蟲草MAT1-1交配型引物組包括序列SEQ ID NO:1、序列SEQ ID NO:2、序列SEQ ID NO:3和序列SEQ ID NO:4；所述雪峰蟲草MAT1-2交配型引物組包括序列SEQ ID NO:5、序列SEQ ID NO:6、序列SEQ ID NO:7和序列SEQ ID NO:8。

2.一種快速高效檢測雪峰蟲草不同菌株交配型的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一、將待檢測物和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增緩沖液與雪峰蟲草MAT1-1交配型引物組或雪峰蟲草MAT1-2交配型引物組混合，得到混合反應(yīng)液；雪峰蟲草MAT1-1交配型引物組包括序列SEQ ID NO:1、序列SEQ ID NO:2、序列SEQ ID NO:3和序列SEQ ID NO:4；所述雪峰蟲草MAT1-2交配型引物組包括序列SEQ ID NO:5、序列SEQ ID NO:6、序列SEQ ID NO:7和序列SEQ ID NO:8；

步驟二、將混合反應(yīng)液加熱進(jìn)行環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增；

步驟三、根據(jù)混合反應(yīng)液顏色得到待檢測物是否為雪峰蟲草MAT1-1交配型或雪峰蟲草MAT1-2交配型。

3.如權(quán)利要求2所述的快速高效檢測雪峰蟲草不同菌株交配型的方法，其特征在于，所述步驟一中，混合反應(yīng)液中包括10×BstBuffer 2體積份，100mM Mg₂SO₄ 1.6體積份，10mMdNTPs 2.8體積份，雪峰蟲草MAT1-1交配型引物組或雪峰蟲草MAT1-2交配型引物組Ox1F共1體積份；引物組中各引物摩爾量相同；8U/μlBst DNA polymerase 0.8-1.5體積份，3mM羥基萘酚藍(lán)溶液0.8體積份，10-200ng/μL待檢測物1體積份，然后加ddH₂O補(bǔ)足至20體積份。

4.如權(quán)利要求2所述的快速高效檢測雪峰蟲草不同菌株交配型的方法，其特征在于，所述步驟二中，加熱溫度為61-63℃，加熱時(shí)間為0.75-1.5h。

5.如權(quán)利要求2所述的快速高效檢測雪峰蟲草不同菌株交配型的方法，其特征在于，所述待檢測物為所需檢測樣本的DNA。