[發明專利]分泌丙硫氧嘧啶單克隆抗體的雜交瘤細胞株、單克隆抗體及應用

有效

• 申請號: 202011007632.2
• 申請日: 2020-09-23
• 公開（公告）號: CN112094817B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 章虎;錢鳴蓉;邊超;周婷婷;趙月鈞
• 申請（專利權）人: 綠城農科檢測技術有限公司
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/44;G01N33/577
• 代理公司: 浙江永鼎律師事務所 33233
• 代理人: 郭小麗

本發明公開了一種分泌丙硫氧嘧啶單克隆抗體的雜交瘤細胞株、單克隆抗體及應用。該雜交瘤細胞株的保藏編號為CCTCC NO：C2020177。該雜交瘤細胞株能夠產生丙硫氧嘧啶單克隆抗體，該抗體具有特異性識別并高親和力結合丙硫氧嘧啶抗原的能力，可用于丙硫氧嘧啶的檢測。

技術領域

本發明涉及檢測技術領域，具體涉及一種分泌丙硫氧嘧啶單克隆抗體的雜交瘤細胞株、單克隆抗體及應用。

背景技術

丙硫氧嘧啶(Propylthiouracil)又稱丙基硫氧嘧啶，通過抑制甲狀腺內過氧化物酶系統，阻止甲狀腺內酪氨酸的碘化及碘化酪氨酸的縮合，從而抑制甲狀腺激素的合成。大劑量(每日劑量700mg)能使周圍組織中 T4向T3的轉化減少。本品還有免疫抑制作用。由于本品只抑制甲狀腺激素的合成，對已合成的甲狀腺激素無作用，所以治療甲狀腺功能亢進時需要3～4周后才發揮療效。2017年10月27日，世界衛生組織國際癌癥研究機構公布的致癌物清單初步整理參考，丙硫氧嘧啶在2B類致癌物清單中。

丙硫氧嘧啶曾作為飼料添加劑被廣泛使用，其主要作用是通過抑制甲狀腺激素分泌，增大動物的皮下組織、肌肉和腸胃對水分的吸收，達到增重的目的。但甲狀腺拮抗劑具有致畸和致癌作用，食用殘留此類藥物的食品存在巨大的安全風險。因此，歐盟早在1981年即禁止此類藥物用于動物產品。

近年來，我國發現或查處的丙硫氧嘧啶違法添加案件仍時有發生，嚴重影響了我國畜牧業發展，破壞了行業信譽，并對人民群眾身體健康造成了潛在危害。隨著國家對食品安全日益重視，不斷加大違法違規行為打擊力度，丙硫氧嘧啶違法添加行為已大有收斂，整治效果顯著。

目前，國家及行業標準規定的丙硫氧嘧啶權威檢測方法為液相色譜- 質譜技術。此方法靈敏度高、特異性強，可靠性好；但是依賴大型儀器，對操作人員的專業知識儲備要求高，操作繁瑣費時，成本較高，不能廣泛推廣使用。基于抗原-抗體特異性結合的免疫學分析技術例如基于抗原-抗體特異性結合的膠體金免疫層析、熒光免疫層析等檢測方法，具有靈敏度、特異性較好，不依賴于大型儀器，操作方便、時間短、成本低的特點，是一種易于現場即時使用的檢測技術。如能開發用于檢測丙硫氧嘧啶的基于免疫層析反應的檢測方法及產品將利于丙硫氧嘧啶檢測的廣泛推廣及使用。

發明內容

基于免疫反應的檢測方法核心是特異性識別丙硫氧嘧啶的單克隆抗體，該抗體的結合靈敏度和特異性決定了檢測方法的準確性，因此好的抗丙硫氧嘧啶單克隆抗體的研制是該類檢測方法開發的關鍵前提。

本發明提供了一株可以分泌特異性識別丙硫氧嘧啶并高親和力結合丙硫氧嘧啶的單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其分泌產生的丙硫氧嘧啶單克隆抗體。

本發明還提供了所述雜交瘤細胞株所分泌的抗體的應用，可用于檢測丙硫氧嘧啶。

本發明提供了以下具體技術方案：

一種雜交瘤細胞株，保藏號為CCTCC NO：C2020177。該細胞株命名為雜交瘤細胞株9F2，于2020年09月10日保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC)，地址湖北武漢，武漢大學，保藏編號為CCTCC NO：C2020177。

一種丙硫氧嘧啶單克隆抗體，由所述的雜交瘤細胞株分泌產生。

所述的丙硫氧嘧啶單克隆抗體能夠特異性識別丙硫氧嘧啶并高親和力結合丙硫氧嘧啶，可用于檢測丙硫氧嘧啶。

所述的丙硫氧嘧啶單克隆抗體可用于制備丙硫氧嘧啶檢測試劑盒，進行丙硫氧嘧啶定性和/或定量測定。

相比于現有技術，本發明的有益效果在于：

首次獲得高效結合丙硫氧嘧啶抗原的單克隆抗體及分泌該抗體的雜交瘤細胞株，為后續抗體試劑應用于丙硫氧嘧啶的檢測提供了基礎。

本發明丙硫氧嘧啶單克隆抗體，能夠特異性識別丙硫氧嘧啶并高親和力結合丙硫氧嘧啶，可用于檢測丙硫氧嘧啶。