[發明專利]基于殼聚糖的特異性靶向納米囊泡及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202011004035.4
• 申請日: 2020-09-22
• 公開（公告）號: CN112190563B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 潘浩波;尹佳
• 申請（專利權）人: 中國科學院深圳先進技術研究院
• 主分類號: A61K9/50
• 分類號: A61K9/50;A61K47/46;A61K9/127;A61K47/60;A61K31/722;A61K41/00;A61P35/00
• 代理公司: 深圳市力道知識產權代理事務所(普通合伙) 44507
• 代理人: 張傳義

1.一種基于殼聚糖的特異性靶向納米囊泡，其特征在于，所述基于殼聚糖的特異性靶向納米囊泡由具有腫瘤細胞特異性靶向的外泌體以及包埋于所述外泌體內的復合納米顆粒組成；

所述復合納米顆粒為負載于超順磁性納米花狀四氧化三鐵納米顆粒表面的金納米團簇和巰基-聚乙二醇-殼聚糖，所述巰基-聚乙二醇-殼聚糖的巰基與所述金納米團簇通過配位結合；

所述基于殼聚糖的特異性靶向納米囊泡按照以下的方法制備：

制備金納米團簇分散液，包括：將氯化鐵溶于乙二醇和二乙二醇的混合溶液中，混勻，隨后在非反應氣氛中加入聚乙烯吡咯烷酮進行反應，待反應結束，向其中加入醋酸鈉，混勻至醋酸鈉全部溶解，轉入反應釜中進行反應，反應結束，采用超純水和無水乙醇交替洗滌產物，并磁分離純化，再加入超純水，混勻，得到超順磁性納米花狀四氧化三鐵（MMNPs）分散液；向所述MMNPs分散液中加入鹽酸多巴胺，混勻，隨后依次加入金種子溶液和老化液，逐滴滴加甲醛溶液，以得到金納米團簇分散液；所述氯化鐵與所述聚乙烯吡咯烷酮的投料量之比為（2~15）mmol：（2~10）g，金種子和超順磁性納米花狀四氧化三鐵納米顆粒的投料比例為（0.4~3.6）mg：（0.67~5）mmol；

制備巰基-聚乙二醇-殼聚糖，包括：將巰基-聚乙二醇-羧基（SH-PEG-COOH）分散于2-(N-嗎啉)乙磺酸（MES）緩沖液中，并加入EDC/NHS，使SH-PEG-COOH的羧基被活化；向活化后的SH-PEG-COOH中加入殼聚糖（CTS），SH-PEG-COOH與CTS的投料摩爾比為1:10~20，活化的羧基與殼聚糖上的氨基發生反應，得到巰基-聚乙二醇-殼聚糖；

按照金納米團簇和巰基-聚乙二醇-殼聚糖的投料質量比例為（1~2）：（8~9），向所述金納米團簇分散液中加入相對分子量為2000-5000的所述巰基-聚乙二醇-殼聚糖，巰基與所述金納米團簇發生配位結合，得到復合納米顆粒；

采用電穿孔技術將所述復合納米顆粒包埋至具有腫瘤細胞特異性靶向的外泌體內，再對所述具有腫瘤細胞特異性靶向的外泌體進行孵育，使所述具有腫瘤細胞特異性靶向的外泌體的外泌體膜得到恢復，并由此獲得基于殼聚糖的特異性靶向納米囊泡。

2.根據權利要求1所述的基于殼聚糖的特異性靶向納米囊泡，其特征在于，所述外泌體選自癌細胞外泌體、免疫細胞外泌體、腫瘤干細胞外泌體、骨髓細胞外泌體、臍帶間充質干細胞外泌體中的至少一種。

3.根據權利要求2所述的基于殼聚糖的特異性靶向納米囊泡，其特征在于，所述復合納米顆粒中巰基-聚乙二醇-殼聚糖的質量含量不小于80%。

4.根據權利要求2所述的基于殼聚糖的特異性靶向納米囊泡，其特征在于，所述復合納米顆粒中巰基-聚乙二醇-殼聚糖的質量含量不小于90%。

5.根據權利要求1~4任一項所述的基于殼聚糖的特異性靶向納米囊泡，其特征在于，所述金納米團簇的粒徑在5nm~30nm之間。