[發明專利]一種俄色果的質量檢測方法

在審

• 申請號: 202011003601.X
• 申請日: 2020-09-22
• 公開（公告）號: CN111999412A
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 羅楓
• 申請（專利權）人: 四川智佳成生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

本發明提供了一種俄色果的質量檢測方法，它是采用高效液相色譜法檢測，其操作步驟如下：1)對照品溶液的制備：取枸杞酸對照品，加水溶解，作為對照品溶液；2)供試品溶液的制備：取待測樣品，加水提取，過濾，取續濾液作為供試品溶液；3)分別吸取對照品溶液和供試品溶液注入液相色譜儀，色譜條件如下：色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：以乙腈為流動相A，以0.1％磷酸溶液為流動相B梯度洗脫。本發明俄色果飲片的質量檢測方法，以枸杞酸作為俄色果及其飲片的測定指標，具有良好的生物活性和一定的專屬性，為俄色果飲片的質量控制提供了更加簡單，有效的方法，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明具體涉及一種俄色果的質量檢測方法。

背景技術

俄色果是薔薇科蘋果屬植物變葉海棠Malus toringoides(Rehd.)Hughes.或花葉海棠Malus transitoria(Batal.)Schneid.的干燥成熟果實，作為甘孜藏族自治州藏族民間習用藥材，在該地區使用歷史悠久，其黃酮類具有降血糖、抗氧化、保肝等作用。專利CN109060985A公開了一種俄色果質量檢測方法，該方法通過分離俄色果中的黃酮類化合物，達到質量檢測的目的，但經研究發現俄色果中還含有枸杞酸(2-O-β-D-Glucopyranosyl-L-ascorbic Acid)，該成分為首次在薔薇科植物中發現，也是首次在俄色果中發現。

據文獻報道，枸杞酸是真正意義上源于天然的、穩定的抗壞血酸衍生物，具有保肝、抗氧化、降血糖等功效，具有較好的生物活性和一定的專屬性。而目前還沒有以枸杞酸判斷俄色果及其飲片質量的方法。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供了一種俄色果的質量檢測方法，它是采用高效液相色譜法檢測，其操作步驟如下：

1)對照品溶液的制備：取枸杞酸對照品，加水溶解，作為對照品溶液；

2)供試品溶液的制備：取待測樣品，粉碎過篩，加水提取，過濾，取續濾液作為供試品溶液；

3)分別吸取對照品溶液和供試品溶液注入液相色譜儀，色譜條件如下：

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：以乙腈為流動相A，以0.1％磷酸溶液為流動相B梯度洗脫；梯度洗脫程序如下：

進一步地，步驟1)所述對照品溶液每1ml含枸杞酸0.5～2mg，優選1mg。

進一步地，步驟2)所述待測樣品為俄色果或其飲片；所述待測樣品與水的質量體積比為0.2-1.2g：25ml，優選0.5g：25ml。

進一步地，步驟2)所述過篩為過4號篩。

進一步地，步驟2)所述提取為超聲提取，超聲提取功率500W，頻率40kHz，時間45min。

進一步地，步驟3)所述注入液相色譜儀的溶液體積為10～20μ；所述色譜條件的檢測波長為235nm，流動相流速0.5mL/min，柱溫為25-30℃；所述色譜柱為InertSustain C18柱，規格4.6mm×250mm，5μm。

更進一步地，步驟3)所述注入液相色譜儀的溶液體積為10μl；所述色譜條件的柱溫為25℃。

本發明還提供了一種俄色果和/或俄色果飲片中枸杞酸的含量測定方法，它包括如下步驟：

a、取步驟1)對照品溶液，用水配制成系列濃度對照品溶液,注入高效液相色譜儀，按照步驟3)色譜條件檢測，測定峰面積，得到枸杞酸的標準曲線方程；

b、取待測樣品，按照步驟2)制備供試品溶液，步驟3)色譜條件檢測，測定峰面積，再根據步驟a)標準曲線方程計算待測樣品中枸杞酸含量。