[發明專利]一種涎液化糖鏈抗原測定試劑盒及其檢測方法

在審

• 申請號: 202011000129.4
• 申請日: 2020-09-22
• 公開（公告）號: CN112285359A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 劉光華;楊玉軍
• 申請（專利權）人: 廣州市伊川生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文

本發明涉及體外診斷試劑技術領域，尤其涉及一種涎液化糖鏈抗原測定試劑盒及其檢測方法。本發明的涎液化糖鏈抗原檢測試劑盒，包括試劑R1、試劑R2；試劑R1包括：穩定劑5～50g/L、防腐劑0.05～2g/L，并利用緩沖液調節pH為2～9；試劑R2包括：表面活性劑5～30g/L、穩定劑5～30g/L、抗人涎液化糖鏈抗原抗體乳膠顆粒結合物0.1～2g/L、防腐劑0.05～2g/L，并利用緩沖液調節pH為2～9。本發明試劑盒靈敏度高，最低檢測能夠達到50.0U/mL，且線性范圍廣，可達50～10000U/mL，可實現對涎液化糖鏈抗原的準確檢測。

技術領域

本發明涉及體外診斷試劑技術領域，尤其涉及一種涎液化糖鏈抗原測定試劑盒及其檢測方法。

背景技術

涎液化糖鏈抗原(Krebs Von Den Lungen-6，KL-6)是一種跨膜高分子量黏蛋白，含有分子量約為200KD的唾液酸化糖鏈，該糖鏈主要是由20個氨基酸殘基組成的串聯重復序列，具有被特異性抗體識別的空間結構表位。KL-6在肺支氣管上皮的膜表面二硫鍵處形成肺支氣管上皮被覆液，主要表達于Ⅱ型肺泡細胞和支氣管上皮細胞的細胞質和胞膜。有研究指出，KL-6不僅是構成肺組織間質的蛋白質，還可作為肺組織高度特異性的標志。

間質性肺炎(IP)是以肺間質為主要病變部位的疾病。正常肺泡壁出現炎癥或損傷后，肺間質逐漸變厚、變硬，隨著病情惡化肺部會出現纖維化，從而引起肺部通氣功能障礙，導致供氧不足，表現出呼吸困難等癥狀。間質性肺炎已知的病因包括自身免疫疾病引起、長期吸入粉塵顆粒物、以及使用藥物(抗癌藥、免疫抑制劑等)。患者表現為活動后氣嘴、日常干咳，藥物副作用加重等癥狀。

KL-6可以對肺間質狀態進行檢測，幫助選擇治療藥物，也可用于判斷停藥時間。當發生間質性肺炎等情況時，肺泡上皮細胞受到損傷后會向血液中釋放KL-6，使血液中KL-6蛋白的濃度升高。活動期的間質性肺炎患者血液中存在高濃度的KL-6，有效的治療可以降低測定值。

近年來，隨著醫學各種檢查技術的不斷發展，尤其是肺部影像學如高分辨CT在臨床中的廣泛應用，提高了間質性肺炎患者早期診斷準確率，但間質性肺炎治療并未取得實質性進展，部分患者的預后差，死亡率高。早期診斷和治療可改善患者預后，故目前除臨床已用于間質性肺炎診斷的肺CT、肺功能、血氣分析、支氣管鏡及肺活檢等手段外，與間質性肺炎疾病發展及轉歸有關的血清學檢測亦成為研究熱點，目前，有許多研究者認為KL-6在間質性肺炎的早期診斷及病變程度、發生、進展、藥物療效及預后評價均有重要價值。

目前現有技術中，涎液化糖鏈抗原的檢測方法有酶聯免疫吸附測定(ELISA)、化學發光免疫分析法(CLIA)和免疫濁度法(INA、ITA)。在酶聯免疫吸附測定中，其檢測靈敏度高，但操作過程略顯復雜、測定時間較長、影響因素多，且此法主要應用于科學研究，不能用于臨床診斷；在化學發光免疫分析法測定中，其自動化操作速度快、準確度高，但是成本高、設備昂貴、穩定性較差，無法普及中基層醫院及醫療機構；免疫濁度法又可分為散射比濁(INA)和透射比濁(ITA)，這類方法的優點是快速簡便，精密度高、易于自動化，適于大批量標本的同時檢測，也可進行少量樣本和急診樣本的測定，具有很強的適用性。散射比濁(INA)法由于其光波接收方式的特點，通常測試結果的靈敏度與測速要優于透射比濁，但需要專門儀器的散射比濁儀或特種蛋白儀，與專用配套試劑，測定成本較高，不易于在基層醫院中推廣使用。透射比濁(ITA)法，操作簡便適用性強，普通自動生化分析儀和分光光度計均可使用，更易于被常規分析所采用，幾乎所有的各實驗室、基層醫院均能開展，不足的是靈敏度和精密度均不夠理想。

因此，亟待在現有的涎液化糖鏈抗原膠乳增強免疫比濁法檢測試劑盒的制備基礎上進行改良，提高涎液化糖鏈抗原檢測試劑盒的靈敏度、精密度、適用性是目前的市場需求。

發明內容

因此，針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種涎液化糖鏈抗原測定試劑盒及其檢測方法，可以實現對涎液化糖鏈抗原的準確檢測。