[發(fā)明專利]一種適用于有機(jī)農(nóng)業(yè)的生物有機(jī)肥料及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010995721.6
• 申請(qǐng)日: 2020-09-21
• 公開（公告）號(hào): CN113185347A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫軍偉;尚海麗;張建斌;范志勇;朱艱;盤文政;王斌;張琪
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南省微生物發(fā)酵工程研究中心有限公司;云南省煙草公司大理州公司
• 主分類號(hào): C05G3/00
• 分類號(hào): C05G3/00;C05G3/80;A01G22/40;C05F17/20;C12N1/20;C12N1/14;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/66;C12R1/69
• 代理公司: 昆明鴻昊知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 53211
• 代理人: 陳芃綦

1.一種適用于有機(jī)農(nóng)業(yè)的生物有機(jī)肥料，其特征在于：它包括有機(jī)肥原料以及有機(jī)肥原料重量1‰-5‰的腐熟劑、有機(jī)肥原料重量1‰-5‰的功能菌劑；

所述有機(jī)肥原料包括以下重量份的原料；油枯8-12份、磷礦粉0.5-1份、鉀長(zhǎng)石0.5-1份、腐植酸1-2份；

所述腐熟劑為腐熟劑發(fā)酵液，由一株嗜熱脂肪芽孢桿菌、兩株枯草芽孢桿菌混合復(fù)配，嗜熱脂肪芽孢桿菌、兩株枯草芽孢桿菌的保藏登記號(hào)分別為CGMCC No.15852、CGMCCNo.15842、CGMCC No.15844；

所述功能菌劑為功能菌劑發(fā)酵液，由一株臭曲霉、一株膠凍樣芽孢桿菌、一株米曲霉、一株側(cè)孢芽孢桿菌混合復(fù)配，臭曲霉、膠凍樣芽孢桿菌、米曲霉、側(cè)孢芽孢桿菌的保藏登記號(hào)分別為CGMCC No.5857、CGMCC No.15853、CGMCC No.19923、CGMCC No.20153。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種適用于有機(jī)農(nóng)業(yè)的生物有機(jī)肥料，其特征在于：其制備方法包括以下步驟：

第一步，芽孢桿菌屬菌種活化：將-80℃條件下采用甘油保存的芽孢桿菌菌株保存液取0.1ml接種到10ml的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基中，在溫度為35℃-38℃、轉(zhuǎn)速為160rpm條件下活化培養(yǎng)24h-48h，得到菌種的活化培養(yǎng)液，所述芽孢桿菌屬菌種為嗜熱脂肪芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌；

第二步，霉菌屬菌種活化：將-80℃條件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接種到10ml的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基中，在溫度為25℃-28℃、轉(zhuǎn)速為120rpm條件下活化培養(yǎng)48h-120h，得到菌種的活化培養(yǎng)液，所述霉菌屬菌種為臭曲霉、米曲霉；

第三步，種子液制備：用無(wú)菌接種環(huán)刮取一環(huán)第一步中芽孢桿菌屬活化培養(yǎng)液中的種子菌落接種到50ml牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中，在溫度為35℃-38℃、轉(zhuǎn)速為160rpm條件下活化培養(yǎng)48h-72h，得芽孢桿菌屬種子液；用無(wú)菌接種環(huán)刮取一環(huán)第二步中霉菌屬菌種活化培養(yǎng)液中的種子菌落接種到50ml PDB液體培養(yǎng)基中，在溫度為25℃-28℃、轉(zhuǎn)速為120rpm條件下活化培養(yǎng)72h-120h，得霉菌屬種子液；

第四步，腐熟劑發(fā)酵液的制備：將第三步中制備的嗜熱脂肪芽孢桿菌、兩株枯草芽孢桿菌的種子液按照1‰-5‰的重量比，分別將種子液接種到發(fā)酵罐中的發(fā)酵培養(yǎng)液中，在溫度為35℃-38℃，轉(zhuǎn)速為120rpm/min條件下培養(yǎng)48h-60h，得發(fā)酵液，然后將三種發(fā)酵液按照0.5-1.5∶1-3∶0.5-2的質(zhì)量比進(jìn)行復(fù)配，得腐熟劑發(fā)酵液；

第五步，功能菌劑發(fā)酵液的制備：將第三步中制備的膠凍樣芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌的種子液按照1‰-5‰的質(zhì)量比，分別將種子液接種到發(fā)酵罐中的發(fā)酵培養(yǎng)液中，在溫度為35℃-38℃，轉(zhuǎn)速為120rpm/min條件下培養(yǎng)48h-60h，得膠凍樣芽孢桿菌發(fā)酵液、側(cè)孢芽孢桿菌發(fā)酵液；

將第三步中制備的臭曲霉、米曲霉的種子液按照1‰-5‰的質(zhì)量比，分別將種子液接種到發(fā)酵罐中的發(fā)酵培養(yǎng)液中，在溫度為25℃-28℃，轉(zhuǎn)速為120rpm/min條件下培養(yǎng)72h-96h，得臭曲霉發(fā)酵液、米曲霉發(fā)酵液；

將臭曲霉發(fā)酵液、膠凍樣芽孢桿菌發(fā)酵液、米曲霉發(fā)酵液、側(cè)孢芽孢桿菌發(fā)酵液按照質(zhì)量1-4∶2-3:1.5-3.5：2-5進(jìn)行復(fù)配，得功能菌劑發(fā)酵液；

第六步，生物有機(jī)肥料制備：將油枯、磷礦粉、鉀長(zhǎng)石、腐植酸按質(zhì)量比為油枯8-12份、磷礦粉0.5-1份、鉀長(zhǎng)石0.5-1份、腐植酸1-2份混合，然后將第四步中所得的腐熟劑發(fā)酵液按照重量比1‰-5‰加入混合，調(diào)整物料水分含量為45％-55％，C/N＝25-30，pH為7.2-7.8，物料堆成圓錐體進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵溫度達(dá)到40℃以上，三小時(shí)后開始翻堆，每天進(jìn)行1次翻堆，發(fā)酵溫度降至溫度后停止翻堆，再將第五步中所得的功能菌劑發(fā)酵液按照重量比1‰-5‰加入，混合均勻，得生物有機(jī)肥料。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種適用于有機(jī)農(nóng)業(yè)的生物有機(jī)肥料，其特征在于：所述第四步中腐熟劑發(fā)酵液的有效活菌數(shù)大于2.0×10¹⁰cfu/g。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種適用于有機(jī)農(nóng)業(yè)的生物有機(jī)肥料，其特征在于：所述第五步中的功能菌劑發(fā)酵液的有效活菌數(shù)大于2.0×10¹⁰cfu/g。