[發明專利]高糖飲食誘導的早期干性年齡相關性黃斑變性色素兔模型

在審

• 申請號: 202010991685.6
• 申請日: 2020-09-18
• 公開（公告）號: CN111990339A
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 王鈺嬌
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A61K49/00;A23K20/147;A23K20/158;A23K20/163;A23K50/00
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

本發明公開了一種高糖飲食誘導的早期干性年齡相關性黃斑變性色素兔模型的構建方法，屬于眼科疾病動物模型領域。本發明的方法包括：在青紫藍兔維持飼料中添加重量比40％的蔗糖，持續飼喂青紫藍兔24周。本發明的方法僅需飲食控制，即可使動物產生年齡相關性黃斑變性的癥狀，簡單便捷，易于產業化應用。

技術領域

本發明屬于眼科疾病動物模型領域。

背景技術

年齡相關性黃斑變性(age-related macular degeneration，AMD)是導致發達地區50歲以上人群不可逆性盲的首要病因。中國由于人口老齡化日趨嚴重，AMD也已成為重要的致盲性眼病。由于發病機制不清，一直是眼科臨床工作的重點及難點。AMD根據發病階段分為早期AMD和晚期AMD，前者以早期的玻璃膜疣、視網膜色素上皮層(RPE)和光感受器細胞改變，即干性(萎縮性)AMD為特征，也會進展為脈絡膜新生血管(CNV)，即濕性(滲出性)AMD；晚期AMD以累及黃斑中心的地圖樣萎縮為特點。臨床上約90％的患者為干性AMD。雖然目前對于濕性AMD的診斷和治療研究(如抗VEGF治療)有了很大的進展，但是對于早期干性AMD和晚期地圖樣萎縮，迄今仍無有效的治療和預防措施。此外，由于醫學倫理的限制，多數對AMD在視網膜脈絡膜結構、功能及生化方面的研究不能直接以人作為研究對象，臨床標本來源困難，干性AMD成為AMD研究的瓶頸，因此需要選擇合適的動物疾病模型來指導其研究，通過模擬人早期干性AMD的結構、功能及代謝特征來探索其發病機制和開發新型治療以期阻止或者延緩干性AMD進程。

目前的早期干性AMD動物模型主要有基因敲除模型、藥物誘導模型、光損傷視網膜模型等。

轉基因/基因編輯模型主要針對于AMD相關基因進行基因敲除(例如：單核細胞趨化因子2、載脂蛋白E)，但其周期長，成模率低，對人員設備要求高，不適合推廣應用。

藥物誘導模型是通過眼注射碘酸鈉、聚乙二醇等藥物，對人員技術要求高，且容易導致視網膜發生不可逆的急性損壞，不適合AMD模型研究。

光損傷模型是用藍光照射動物，光線入眼后可誘發視紫紅質、脂褐素等感光分子產生活性氧，導致感光細胞外節盤膜的脂質過氧化，誘導感光細胞凋亡，對視網膜造成損傷。該方法需要精準可控的藍光發生裝置，對設備有較高要求。

上述主流方法存在周期長、對人員設備要求高或對動物傷害過重等問題，不利于產業化應用。

在動物日常飲食中額外添加脂肪和糖(即“高脂高糖飲食”)，曾被認為是一種簡單可行的早期干性AMD造模方法。發明人前期用8-13歲雄性老年恒河猴作為對象，發現喂養18-24月后，均未見脈絡膜及視網膜色素上皮的顯著改變，即無法成功造模。CN107787912A公開了一種干性AMD造模方法，是將蔗糖、豬油、膽固醇、膽酸鹽按質量比5～15：5～15:0.5～1.5:0.1～1.0的比例進行混合，制備成半流質膳食，通過鼻飼管每天灌注一次(該配方必須人工灌注，否則猴子在攝入一定量飼料后就不再攝入)，每天灌注9.2～17.2g/kg體重，持續15個月。其周期長，人工灌注操作繁瑣，不適用于產業化應用。

發明內容

本發明要解決的問題是：提供一種簡單有效的早期干性AMD動物模型的構建方法。

本發明提供了如下技術方案：

本發明首先提供了一種早期干性黃斑變性色素兔模型的構建方法，它包括：

每日使色素兔攝入36～67.5g蔗糖，持續16～30周。

進一步的，所述構建方法包括：

每日使色素兔攝入40～60g蔗糖，持續16～30周。

進一步的，所述蔗糖是按重量比36％～45％添加到兔維持飼料中，制成高糖飼料，對色素兔進行飼喂，每日飼喂高糖飼料100～150g；