[發(fā)明專利]一種稻飛虱室內(nèi)生物測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010989023.5
• 申請(qǐng)日: 2020-09-18
• 公開（公告）號(hào): CN112106733B
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊保軍;劉淑華;王愛英;羅舉;唐健
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)水稻研究所
• 主分類號(hào): A01K67/033
• 分類號(hào): A01K67/033
• 代理公司: 浙江千克知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33246
• 代理人: 周磊

本發(fā)明公開了一種稻飛虱室內(nèi)生物測(cè)定方法，步驟包括：S1：將盆栽水稻苗在吡蚜酮梯度稀釋液中浸漬；S2：將未交配的稻飛虱試蟲接入盆栽水稻苗，直至羽化成雌雄成蟲完成交配；S3：將完成交配的稻飛虱雌性成蟲分別單頭飼養(yǎng)于稻飛虱產(chǎn)卵裝置中，以稻飛虱雌性成蟲是否產(chǎn)生F1代孵蟲判定可育性；S4：計(jì)算試蟲不育雌蟲率；S5：根據(jù)吡蚜酮梯度稀釋液的系列濃度和試蟲不育雌蟲率得到毒力回歸線，計(jì)算不育中濃度。本發(fā)明的有益效果在于，將雌蟲不育率作為稻飛虱對(duì)藥劑的反應(yīng)指標(biāo)，提高了測(cè)定的準(zhǔn)確性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種稻飛虱室內(nèi)生物測(cè)定方法，主要應(yīng)用在植物保護(hù)的技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

稻飛虱是危害亞洲水稻的重要害蟲，在我國(guó)南北稻區(qū)均有發(fā)生，其種類主要包括褐飛虱Nilaparvata lugens、白背飛虱Sogatella furcifera和灰飛虱Laodelphax striatellus。該類蟲可通過直接刺吸稻株汁液，雌蟲產(chǎn)卵以及通過這些行為傳播病毒病造成危害，每年造成產(chǎn)量損失巨大。

生產(chǎn)上對(duì)稻飛虱的防治主要是使用化學(xué)殺蟲劑，開展殺蟲劑對(duì)稻飛虱室內(nèi)生物測(cè)定是合理選擇藥劑的基礎(chǔ)。現(xiàn)有的方法有點(diǎn)滴法、噴霧法、藥膜法、稻莖浸漬法、稻苗浸根法和稻苗浸漬法等，采用這些方法可計(jì)算藥劑的LD₅₀或LC₅₀，來評(píng)價(jià)稻飛虱對(duì)藥劑的敏感性，進(jìn)而獲得田間種群的抗性倍數(shù)（RR）。隨著特效殺蟲劑吡蟲啉等藥劑因抗性和安全性等問題被限制或禁止用于稻田，吡啶甲亞胺類殺蟲劑吡蚜酮（Pymetrozine, PYM）成為近年來防治稻飛虱的首選藥劑。國(guó)內(nèi)吡蚜酮對(duì)褐飛虱室內(nèi)毒力測(cè)定方法主要依據(jù)水稻褐飛虱抗藥性監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)程（NY/T 1708-2009），其步驟包括浸漬法或浸苗法處理低齡若蟲，觀察5～10d后的死亡蟲數(shù)，最終獲得藥劑的LC₅₀，2011～2015年的抗性監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)國(guó)內(nèi)多個(gè)稻區(qū)田間褐飛虱種群對(duì)吡蚜酮產(chǎn)生了中等水平的抗性。隨著生產(chǎn)上對(duì)該藥劑過渡依賴，預(yù)示田間褐飛虱抗種水平將會(huì)進(jìn)一步上升，最新已發(fā)現(xiàn)采用該方法時(shí)高劑量吡蚜酮對(duì)田間種群已無明顯致死活性（死亡率達(dá)50～90%），無法獲得量化結(jié)果（LC₅₀）。國(guó)際殺蟲劑抗性行動(dòng)委員會(huì)（IRAC）推薦的吡蚜酮對(duì)褐飛虱生物測(cè)定方法是以試蟲F1代孵蟲數(shù)為反應(yīng)指標(biāo)（Method NO.005），其主要流程為吡蚜酮浸苗法處理稻苗后接入雌蟲，記錄F1代孵蟲數(shù)來考查試蟲敏感性，但不能計(jì)算LC₅₀；日本學(xué)者Katsuhiko等對(duì)這一方法進(jìn)行了改進(jìn)，用點(diǎn)滴法處理雌蟲，考查F1代孵蟲數(shù)，可計(jì)算獲得藥劑的有效中濃度（ED₅₀），但未見實(shí)現(xiàn)對(duì)田間種群的抗性評(píng)價(jià)。分析該方法尚有如下問題：處理雌蟲為羽化1～5天，存在羽化天數(shù)或交配天數(shù)差異，以及多頭雌蟲產(chǎn)卵（5或10頭）所用的稻苗生長(zhǎng)條件（株數(shù)、莖桿粗細(xì)等）本身載卵能力差異，易造成產(chǎn)卵量不同；長(zhǎng)勢(shì)良好稻苗產(chǎn)卵潛力高，在低劑量或?qū)φ仗幚碇幸子谠陬A(yù)定的觀察時(shí)間即出現(xiàn)超量孵化若蟲過渡取食而出現(xiàn)的苗枯蟲死現(xiàn)象造成計(jì)數(shù)誤差；以劑量-雌蟲F1代孵蟲量獲得的EC₅₀與標(biāo)準(zhǔn)的劑量-死亡率Finney機(jī)率值分析法吻合性差。

現(xiàn)有的以試蟲死亡率為反應(yīng)指標(biāo)評(píng)價(jià)結(jié)果的稻飛虱生物測(cè)定方法對(duì)高水平抗性種群無明顯致死活性不能滿足需求，而以F1代若蟲孵化量作為反應(yīng)指標(biāo)來評(píng)價(jià)結(jié)果的方法存在若干問題未見應(yīng)用于田間種群的抗性評(píng)價(jià)。因此，為了準(zhǔn)確檢測(cè)褐飛虱對(duì)殺蟲劑的抗性水平，合理利用該類殺蟲劑，急需建立一套可以開展室內(nèi)或田間稻飛虱抗性種群抗性水平準(zhǔn)確、量化檢測(cè)的新型生物測(cè)定方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種稻飛虱室內(nèi)生物測(cè)定方法，將雌蟲不育率作為稻飛虱對(duì)藥劑的反應(yīng)指標(biāo)，提高了測(cè)定的準(zhǔn)確性。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。

一種稻飛虱室內(nèi)生物測(cè)定方法，步驟包括：

步驟S1：將盆栽水稻苗在吡蚜酮梯度稀釋液中浸漬10-30s，然后將水稻苗晾干；