[發(fā)明專利]一種組織芯片制芯的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010986636.3
• 申請(qǐng)日: 2020-09-18
• 公開（公告）號(hào): CN114199658A
• 公開（公告）日: 2022-03-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊江濤;陳鑫;劉蓓
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中科光華（西安）智能生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N1/36
• 分類號(hào): G01N1/36;G01N21/84
• 代理公司: 北京細(xì)軟智谷知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11471
• 代理人: 葛鐘

本申請(qǐng)涉及一種組織芯片制芯的方法，屬于組織芯片技術(shù)領(lǐng)域，本申請(qǐng)中方法包括：利用數(shù)字化掃描儀掃描石蠟切片，獲取掃描放大的掃描圖像；基于所述掃描圖像進(jìn)行鏡下標(biāo)記，并根據(jù)標(biāo)記結(jié)果從切片對(duì)應(yīng)的蠟塊中獲取有效靶組織作為組織芯片柱芯。本申請(qǐng)基于數(shù)字化智能掃描切片進(jìn)行精準(zhǔn)靶組織標(biāo)記，大大減少了構(gòu)建的中高密度組織芯片的無效點(diǎn)，明顯提升了組織芯片的核心質(zhì)量及精準(zhǔn)度，減少了惡性腫瘤組織芯片每個(gè)點(diǎn)異質(zhì)性差異，靶組織內(nèi)細(xì)胞的新鮮度得到了有效保證，進(jìn)而提高了免疫組化和基因研究的準(zhǔn)確性。且能降低病理醫(yī)生標(biāo)記工作強(qiáng)度，縮短組織芯片制作時(shí)間并減少了廢品率，從而節(jié)約了人力、物力和財(cái)力。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)屬于組織芯片技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種組織芯片制芯的方法。

背景技術(shù)

組織芯片(tissue chip，TC)又稱組織微陣列(tissue microarray，TMA)，與基因芯片、蛋白質(zhì)芯片及細(xì)胞芯片等一樣，為生物芯片技術(shù)中的一個(gè)組成部分，屬于生物高科技技術(shù)。組織芯片是將幾十、幾百例不同個(gè)體的組織標(biāo)本按預(yù)定序列排列在載體上，進(jìn)行形態(tài)學(xué)或分子生物學(xué)方面實(shí)驗(yàn)的一種新型的高通量、多樣本的研究工具。組織芯片技術(shù)具有信息量大，實(shí)驗(yàn)誤差小、可比性強(qiáng)、省時(shí)、省力、可大量節(jié)約經(jīng)費(fèi)等優(yōu)點(diǎn)，與傳統(tǒng)的病理學(xué)技術(shù)、組織化學(xué)技術(shù)、免疫組化技術(shù)(IHC)、原位雜交技術(shù)(ISH)、熒光核酸原位雜交技術(shù)(FISH)和原位PCR技術(shù)等相結(jié)合，可實(shí)現(xiàn)對(duì)正常或病變組織標(biāo)本進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和特定基因及其所表達(dá)的蛋白質(zhì)等不同分子水平上研究，其逐漸應(yīng)用于涉及醫(yī)學(xué)、生物學(xué)及動(dòng)植物學(xué)等領(lǐng)域的科研、臨床、教學(xué)、生物試劑測(cè)試、質(zhì)量監(jiān)控及標(biāo)準(zhǔn)化等領(lǐng)域。

微陣列組織芯片技術(shù)的核心之一在于每個(gè)位點(diǎn)內(nèi)的信息的準(zhǔn)確性和靶組織的量，近年來隨著生物制藥不斷發(fā)展，對(duì)組織芯片的要求越來越高，尤其是中高密度大樣本組織芯片需求增加。而制作密度越大、信息量越多的組織芯片，就必須減小每一位點(diǎn)直徑，比如點(diǎn)樣直徑從80點(diǎn)組織芯片的1.5mm直徑，到100點(diǎn)以上甚至240點(diǎn)以上組織芯片的1.0mm-0.6mm直徑。每一位點(diǎn)直徑隨著點(diǎn)數(shù)增加而減小，在點(diǎn)樣直徑縮小的同時(shí)要保證足夠的靶細(xì)胞量及靶組織有效性，勢(shì)必增加了每一位點(diǎn)組織芯片核心質(zhì)量的難度。

TMA構(gòu)建過程中，病理組織學(xué)標(biāo)記始終貫穿于中，而目前病理標(biāo)記主要還是通過手工光鏡下定位，標(biāo)記范圍大，定位精確性不高，對(duì)于靶組織的新鮮度、靶組織量把握不準(zhǔn)，導(dǎo)致免疫組化等實(shí)驗(yàn)結(jié)果不穩(wěn)定，假陰性、假陽性時(shí)有發(fā)生；同時(shí)現(xiàn)有病理標(biāo)記存在水平層次不齊、以及組織分層出現(xiàn)靶組織量過少，壞死、出血及纖維組織過多，甚至掉片脫失而出現(xiàn)較多無效點(diǎn)的問題，導(dǎo)致制芯后的芯片核心質(zhì)量不高，從而會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)效果不理想，浪費(fèi)人力、物力和財(cái)力。

上述內(nèi)容僅用于輔助理解本發(fā)明的技術(shù)方案，并不代表承認(rèn)上述內(nèi)容是現(xiàn)有技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容

為至少在一定程度上克服相關(guān)技術(shù)中存在的問題，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N組織芯片制芯的方法，基于數(shù)字化智能掃描切片進(jìn)行精準(zhǔn)靶組織標(biāo)記，有助于較好實(shí)現(xiàn)高密度組織芯片的制作標(biāo)記。

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本申請(qǐng)采用如下技術(shù)方案：

本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N組織芯片制芯的方法，該方法包括：

利用數(shù)字化掃描儀掃描石蠟切片，獲取掃描放大的掃描圖像；

基于所述掃描圖像進(jìn)行鏡下標(biāo)記，并根據(jù)標(biāo)記結(jié)果從切片對(duì)應(yīng)的蠟塊中獲取有效靶組織作為組織芯片柱芯。

可選地，所述基于所述掃描圖像進(jìn)行鏡下標(biāo)記，包括：

根據(jù)所述掃描圖像對(duì)切片進(jìn)行觀察評(píng)估，

針對(duì)切片中有效靶組織少而無效組織多的情況，采用病理組織學(xué)局域標(biāo)記法進(jìn)行鏡像下標(biāo)記，

而針對(duì)切片中有效靶組織多而無效組織少的情況，采用精準(zhǔn)涂鴉法進(jìn)行鏡像下標(biāo)記。

可選地，所述采用病理組織學(xué)局域標(biāo)記法進(jìn)行鏡像下標(biāo)記，具體為：