[發(fā)明專利]淮山多糖的提取方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010986564.2
• 申請日: 2020-09-18
• 公開（公告）號: CN112062868B
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王鋒;張錦鈺;蘇小軍;李清明;秦丹;郭紅英;劉志偉
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京潤平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283
• 代理人: 張苗

1.一種淮山多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）將淮山和尿素-氯化膽堿低共熔溶劑混合，加熱提取，冷卻后分離出提取液；

（2）將步驟（1）所得提取液與酶混合進行酶解，將酶解產(chǎn)物進行固液分離，得到濾液；

所述酶為α-淀粉酶、普魯蘭酶和糖化酶，所述酶解過程包括：

S1向步驟（1）得到的提取液中加入α-淀粉酶水溶液，酶解得到一級酶解液；

S2向一級酶解液中加入普魯蘭酶水溶液，酶解得到二級酶解液；

S3向二級酶解液中加入糖化酶水溶液，酶解得到三級酶解液；

（3）醇沉步驟（2）得到的濾液并洗滌，得到粗淮山多糖沉淀；

其中，所述尿素-氯化膽堿低共熔溶劑中尿素和氯化膽堿的摩爾比為4-6:1，所述尿素-氯化膽堿低共熔溶劑的含水量為18-25wt%。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，所述步驟（1）中，以1g淮山為基準(zhǔn)，尿素-氯化膽堿低共熔溶劑的用量為30-50mL；

所述淮山為粉狀，粒徑為178-250微米。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，所述混合過程采用超聲混合，所述超聲功率為100-200W，所述超聲時間為20-40min；

所述加熱提取采用水浴加熱提取，所述水浴加熱溫度為80-100℃，時間為40-60 min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，所述α-淀粉酶水溶液的濃度為120-150U/mL，以提取液的體積為基準(zhǔn)，所述α-淀粉酶水溶液的添加量為2-2.5%；

所述普魯蘭酶水溶液的濃度為200-250U/mL，以提取液的體積為基準(zhǔn)，所述普魯蘭酶水溶液的添加量為1.5-2%；

所述糖化酶水溶液的濃度為2500-3000U/mL，以提取液的體積為基準(zhǔn)，所述糖化酶水溶液的添加量為1-1.5%。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，所述步驟S1中，酶解溫度為50-52℃，酶解時間為40-60min；

所述步驟S2中，酶解溫度為55-57℃，酶解時間為50-60min；

所述步驟S3中，酶解溫度為55-57℃，酶解時間為50-60min。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，所述步驟（3）中，醇沉的方法包括：向濾液中加入乙醇，并在2-8℃條件下靜置10-15h；所述洗滌過程中采用的洗滌液為乙醇和/或丙酮。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，所述洗滌的方法為離心洗滌，離心速度為2800-3200r/min，離心時間為5-10min，洗滌次數(shù)為2-4次。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，所述提取方法還包括純化粗淮山多糖的步驟，所述步驟包括：加水溶解步驟（3）得到的粗淮山多糖沉淀并洗滌，收集上層清液，去蛋白質(zhì)，干燥；

其中，所述洗滌的方法為離心洗滌，離心速度為2800-3200r/min，離心時間為5-10min，洗滌次數(shù)為2-4次；

去蛋白質(zhì)的方法包括：濃縮上層清液，得到濃縮液Ⅰ，加入sevag試劑，震蕩后分液，收集上層液，重復(fù)次數(shù)使得上層液中蛋白質(zhì)的含量不高于1%。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，所述sevag試劑為氯仿和正丁醇的混合溶液；

所述氯仿和所述正丁醇的體積比為4-6:1；

所述濃縮液Ⅰ與sevag試劑的體積比為3-5:1；

所述震蕩時間為30-40min。

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，溶解過程中，水與粗淮山多糖沉淀的質(zhì)量比為15-25:1；

所述干燥的方法為真空冷凍干燥。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的淮山多糖的提取方法，其特征在于，在真空冷凍干燥前，還包括濃縮所述去蛋白質(zhì)的上層液，使其為原體積的50%-75%。