[發明專利]批量生產3D細胞球的培養基底的制備方法

有效

• 申請號: 202010985599.4
• 申請日: 2020-09-18
• 公開（公告）號: CN112430565B
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發明（設計）人: 呂蘭欣;梁琪;沈紅先;李猛;趙文軒;金春燕;王晶;胡書群
• 申請（專利權）人: 徐州醫科大學
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00;C08J9/42;C08L83/04
• 代理公司: 南京蘇創專利代理事務所(普通合伙) 32273
• 代理人: 高麗

1.批量生產3D細胞球的培養基底的制備方法，其特征在于，具體步驟如下：

步驟1，采用微流控技術制備明膠微球，明膠溶液的濃度為8%，用微流控裝置收集明膠微球，控制水相溶液流速為3~5mL/h，有機相流速為40mL/h，有機相通道的內徑為0.85~1.2mm，水相通道的內徑為0.3~0.45mm，收集溶液為甲醇溶液，采用含3wt%Span80的甲苯為有機相；

步驟2，將明膠微球逐滴從邊緣加入表面皿中，輕微震動表面皿使明膠微球單層排列，并使其浸沒于甲醇中，然后置于70℃~85℃加熱45~60分鐘使微球排列粘結成型，去除殘余的甲醇，獲得整齊排列的單層明膠微球模板；

步驟3，將PDMS的A液和B液按10:1的質量比配制，攪拌均勻，排空氣泡后滴加于單層明膠微球模板上，將PDMS-明膠復合物加熱至PDMS固化成型；

步驟4，將固化成型的PDMS-明膠復合物水浴加熱至明膠微球徹底溶解，獲得PDMS孔狀微陣列基底；

步驟5，將PDMS孔狀微陣列基底浸泡在F127溶液中，最終獲得3D細胞球的培養基底。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2中，加熱溫度為80℃，加熱時間為50分鐘。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3中，加熱溫度為37℃，加熱時間為4小時。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟4中，水浴溫度為45℃，加熱時間為8小時。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟4中，采用邊加熱邊攪拌的形式使明膠微球徹底溶解。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟5中，F127溶液的濃度為10%，浸泡時間為0.5~2小時。