[發(fā)明專利]一種灰飛虱基因LsECP1及其編碼產(chǎn)物與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010983840.X
• 申請日: 2020-09-17
• 公開（公告）號: CN112062825B
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 紀(jì)銳;付健美;李晶;王璐;田甜;方繼朝
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王艷

本發(fā)明公開了一個灰飛虱基因LsECP1及其編碼產(chǎn)物與應(yīng)用，該基因LsECP1具有SEQ ID No.1的DNA序列。該基因序列由881個核苷酸堿基組成，包含一個由558個核苷酸構(gòu)成的完整的編碼框，編碼含有185個氨基酸殘基的小分子量蛋白。研究發(fā)現(xiàn)該基因與灰飛虱的存活、繁殖有關(guān)。構(gòu)建LsECP1的RNAi載體，轉(zhuǎn)入水稻中，在轉(zhuǎn)基因水稻體內(nèi)表達LsECP1基因的dsRNA，可以達到提高水稻對灰飛虱抗性的目的。本發(fā)明將在作物育種，特別是在水稻抗蟲育種中得到廣泛應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種灰飛虱基因LsECP1及其編碼產(chǎn)物與應(yīng)用。

背景技術(shù)

水稻(Oryza sativa L.)是中國乃至全球最重要的糧食作物之一。在中國，每年由于水稻蟲害造成的水稻產(chǎn)量損失巨大，重災(zāi)年份甚至顆粒無收。因此如何通過減少蟲害來增加糧食產(chǎn)量，是當(dāng)今人類必需要面對的迫切問題。

自進入本世紀(jì)以來，稻飛虱發(fā)生范圍和發(fā)生數(shù)量進一步上升。稻飛虱屬于半翅目Hemiptera，飛虱科Delphacidae，主要包括褐飛虱Nilaparvata lugens、白背飛虱Sogatella furcifera、灰飛虱Laodelphax striatellus等，是我國水稻作物上的重要害蟲。其中灰飛虱廣泛分布于亞洲水稻種植區(qū)，它不僅能夠直接吸食水稻汁液造成危害，還能傳播水稻條紋葉枯病和水稻黑條矮縮病等病毒病。近些年來，灰飛虱接連暴發(fā)，所傳播的病毒病發(fā)生范圍進一步擴大、危害程度進一步加重，在長三角稻區(qū)不僅水稻條紋葉枯病引起嚴(yán)重危害，而且黑條矮縮病也呈上升趨勢，對我國的水稻糧食產(chǎn)量造成了嚴(yán)重?fù)p失。在針對灰飛虱的綜合防治體系中，種植抗蟲水稻品種是控制蟲害及其傳播的病毒病最經(jīng)濟有效的方法之一，從而最終實現(xiàn)灰飛虱的可持續(xù)控制。

RNA干擾(RNA interference，RNAi)是指外源或內(nèi)源的dsRNA(double-strandedRNA，dsRNA)特異性地引起靶標(biāo)基因表達沉默的現(xiàn)象，利用RNAi技術(shù)對昆蟲基因進行功能研究已有較多的報道，近幾年，國內(nèi)外嘗試?yán)棉D(zhuǎn)基因植物表達相關(guān)基因dsRNA的方法來沉默取食昆蟲的相應(yīng)靶標(biāo)基因，進而影響昆蟲的存活、發(fā)育和繁殖，希望最終能達到控制害蟲的目的。最近，這一技術(shù)己開始在田間實施，并取得了不錯的效果。其中利用轉(zhuǎn)基因水稻表達褐飛虱相關(guān)基因dsRNA(己糖轉(zhuǎn)運蛋白基因hexose transporter gene，NlHT1、羧肽酶基因carboxypeptidase gene，Nlcar和類胰蛋白酶絲氨酸蛋白酶基因trypsin-like serineprotease，Nltry)，可以在一定程度上降低靶標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄水平，但對褐飛虱的致死效果并不明顯。

至今為止，國內(nèi)外尚沒有克隆到能夠應(yīng)用此技術(shù)的灰飛虱相關(guān)靶標(biāo)基因，可以通過轉(zhuǎn)基因水稻沉默該基因而達到控制灰飛虱為害的目的。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供了一種灰飛虱基因LsECP1。

本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供了灰飛虱基因LsECP1編碼的蛋白。

本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供了表達盒、重組載體或細(xì)胞。

本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供了灰飛虱基因LsECP1，所述的蛋白，所述的表達盒、重組載體或細(xì)胞在獲得抗蟲功能的植物中的應(yīng)用。

本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供了獲得具有抗蟲功能的植物的方法。

本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供了鑒定獲得具有抗蟲功能的植物的方法。

技術(shù)方案：為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種灰飛虱基因LsECP1，其LsECP1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。