[發明專利]一種藍萼香茶菜根提取物、提取分離方法及其應用

在審

• 申請號: 202010967691.8
• 申請日: 2020-09-15
• 公開（公告）號: CN111848376A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 白乃生;王天義;張姍姍;郭森;岳文平;高兵;彭賽男
• 申請（專利權）人: 西北大學
• 主分類號: C07C45/78
• 分類號: C07C45/78;C07C49/743;C07D311/30;C07D311/40;C07D493/08;C07J63/00;A61P25/00;A61P17/00;A61P3/10;A23L33/105
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 徐云俠

1.一種藍萼香茶菜根提取物，其特征在于，包含以下組分：3-氧代-12-烯-28-烏蘇酸5.61～5.93μg/g、熊果酸4.75～5.37μg/g、齊墩果酸4.82～5μg/g、藍萼甲素36.29～37.15μg/g、冬凌草甲素3.2～3.52μg/g、胡麻素2.72～2.86μg/g、藍萼乙素11.32～11.76μg/g、槲皮素6.79～7.51μg/g、木犀草素6.23～6.63μg/g、芹菜素4.49～5.03μg/g。

2.根據權利要求1所述的藍萼香茶菜根提取物的提取分離方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：將藍萼香茶菜根粉末置于體積濃度為90％的乙醇溶液中進行滲漏提取多次，合并多次所得濾液，濃縮，制得浸膏；

S2：將浸膏重懸于水中，再加入乙酸乙酯溶液萃取多次，合并乙酸乙酯層溶液，濃縮，得到乙酸乙酯萃取物；

S3：將S2中的乙酸乙酯萃取物經硅膠填料柱進行柱分離，并用體積比為100-0:1的二氯甲烷-甲醇溶液進行梯度洗脫，得九種餾分；

九種所述餾分分別為：二氯甲烷-甲醇溶液體積比為100-80:1時，洗脫餾分Fr1；二氯甲烷-甲醇溶液體積比為80-70:1時，洗脫餾分Fr2；二氯甲烷-甲醇溶液體積比為70-55:1時，洗脫餾分Fr3；二氯甲烷-甲醇溶液體積比為55-45:1時，洗脫餾分Fr4；二氯甲烷-甲醇溶液體積比為45-35:1時，洗脫餾分Fr5；二氯甲烷-甲醇溶液體積比為35-25:1時，洗脫餾分Fr6；二氯甲烷-甲醇溶液體積比為25-15:1時，洗脫餾分Fr7；二氯甲烷-甲醇溶液體積比為15-7:1時，洗脫餾分Fr8；二氯甲烷-甲醇溶液體積比為7-0:1時，洗脫餾分Fr9；

S4：對S3所得的九種餾分進行柱分離，洗脫，分別制得槲皮素、胡麻素、芹菜素、藍萼乙素、藍萼甲素、木犀草素、熊果酸、冬凌草甲素、3-氧代-12-烯-28-烏蘇酸、齊墩果酸。

3.根據權利要求2所述的藍萼香茶菜根提取物的提取分離方法，其特征在于，所述槲皮素和胡麻素是通過以下步驟分離得到：

將餾分Fr4用100-200目的硅膠為填料進行柱色譜分離，濕法裝柱，用二氯甲烷和甲醇混合溶劑進行洗脫，梯度為60-0:1，合并得到5個部分：二氯甲烷:甲醇體積比為60-30:1時，得到Fr41；二氯甲烷:甲醇體積比30-20:1時，得到Fr42；二氯甲烷:甲醇體積比為20-15:1時，得到Fr43；二氯甲烷:甲醇體積比為15-10:1時，得到Fr44；二氯甲烷:甲醇體積比為10-5:1時，得到Fr45；

將Fr43用反相柱CHP進行分離，洗脫梯度為水-甲醇溶液為洗脫劑，梯度為100：0至0：100，當甲醇體積濃度為60％時，得槲皮素；將Fr44用反相柱CHP進行分離，洗脫梯度為水-甲醇溶液為洗脫劑，梯度為100：0至0：100，當甲醇體積濃度為50％時，得胡麻素。

4.根據權利要求2所述的藍萼香茶菜根提取物的提取分離方法，其特征在于，所述芹菜素和藍萼乙素是通過以下步驟分離得到：

將餾分Fr5用200-300目硅膠柱色譜分離，濕法上樣，以二氯甲烷和甲醇溶劑混合洗脫劑洗脫，梯度為50-0:1，合并得到4個部分：二氯甲烷:甲醇體積比為50-40:1時，得到Fr51；二氯甲烷:甲醇體積比為40-25:1時，得到Fr52；二氯甲烷:甲醇體積比為25-12:1時，得到Fr53；二氯甲烷:甲醇體積比為12-0:1時，得到Fr54；

將Fr53用300-400目的硅膠反復柱層析，乙酸乙酯-石油醚為溶劑洗脫，梯度15-0:1，當乙酸乙酯:石油醚體積比為10:1時，得芹菜素，當乙酸乙酯：石油醚體積比為3:1時，得藍萼乙素。