[發明專利]一種利用固定化細胞技術生產的酶制劑及其制備方法

在審

• 申請號: 202010962419.0
• 申請日: 2020-09-14
• 公開（公告）號: CN112011531A
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 吳新穎;張鐸
• 申請（專利權）人: 泰州飛海印合生機農業科技有限公司
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C12N11/04;C12N9/26;C12N9/42;C12N9/50;C12R1/04;C12R1/07
• 代理公司: 合肥左心專利代理事務所(普通合伙) 34152
• 代理人: 吳朝

1.一種利用固定化細胞技術生產的酶制劑，其特征在于，包括復合酶和填充料，該填充料調整復合酶的固形物含量至5％～10％；其中的復合酶包括淀粉酶、蛋白酶和纖維素酶。

2.根據權利要求1所述的利用固定化細胞技術生產的酶制劑，其特征在于，所述填充料包括淀粉、白炭黑和麥芽糊精。

3.根據權利要求2所述的利用固定化細胞技術生產的酶制劑，其特征在于，所述復合酶是利用固定化細胞技術，由芽孢桿菌和放線菌兩種菌株混合發酵生產的。

4.根據權利要求3所述的利用固定化細胞技術生產的酶制劑，其特征在于，所述填充料調整復合酶的固形物含量至8％。

5.一種利用固定化細胞技術生產的酶制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一：將芽孢桿菌和放線菌的菌株于改良PDA斜面上活化，而后接種于改良PDA液體培養基培養，再用無菌生理鹽水離心洗滌，取菌體沉淀4℃保藏備用；

步驟二：通過固定化細胞技術對由芽孢桿菌和放線菌組成的濕菌體進行處理，得到固定化菌體小球；

步驟三：將上述的固定化菌體小球放入改良PDA液體培養基中進行預培養，而后放入產酶培養基中培養，得到粗酶液；

步驟四：將粗酶液進行濃縮處理得到精酶液；

步驟五：精酶液干燥之后采用填充料調整復合酶的固形物含量至5％～10％，制備得到酶制劑。

6.根據權利要求5所述的利用固定化細胞技術生產的酶制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟二中固定化菌體小球的制備為：取2.5％海藻酸鈉溶液，加入濕菌體，攪拌混勻，用8號針頭從離液面10cm高處將其滴入2％CaCl₂溶液中，濾出凝膠小球，重新置于2％CaCl₂溶液中，4℃靜置硬化。

7.根據權利要求5所述的利用固定化細胞技術生產的酶制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟二中固定化菌體小球的制備為：將2.5％海藻酸鈉溶液中加入1％的殼聚糖，配制海藻酸鈉殼聚糖膠體溶液；取該溶液，加入濕菌體，攪拌混勻，用8號針頭從離液面10cm高處將其滴入2％CaCl₂溶液中，濾出凝膠小球，重新置于入2％CaCl₂溶液中，4℃靜置硬化。

8.根據權利要求5所述的利用固定化細胞技術生產的酶制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟二中固定化菌體小球的制備為：取濕菌體配制菌體懸液；將2.5％殼聚糖膠體溶液用8號針頭滴入凝結液(20％甲醇和30％NaOH)中，作用后得到中空殼聚糖球，取出用去離子水洗滌，而后放入菌體懸液中，吸附，取出殼聚糖球并用無菌生理鹽水洗滌。