[發明專利]一種卡貝縮宮素雜質Gly9-OH的制備方法

有效

• 申請號: 202010953259.3
• 申請日: 2020-09-11
• 公開（公告）號: CN112010945B
• 公開（公告）日: 2022-09-16
• 發明（設計）人: 付曉平;高劍;鐘國慶;朱永洲;李元波
• 申請（專利權）人: 成都諾和晟泰生物科技有限公司
• 主分類號: C07K7/16
• 分類號: C07K7/16;C07K1/16;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/02
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王洋

本發明提供了卡貝縮宮素雜質Gly9?OH的制備方法，采用固相合成和液相合成結合合成主鏈樹酯。采用2?CTC Resin，Boc?Tyr(Me)?OH,Fmoc?Ile?OH,Fmoc?Gln(X)?OH,Fmoc?Asn(X)?OH、Fmoc?Cys((CH₂)₃COOtBu)?OH、Fmoc?Pro?OH和Fmoc?Leu?OH作為起始原料參與合成樹脂主鏈，通過裂解獲得粗肽純度高于95％。通過液相縮合接上H?Gly?OBzl得到帶保護基的直鏈肽雜質，再脫掉Boc、Trt和tBu并關環得到環化中間肽，最后氫化脫芐基得到Gly9?OH粗品，純化后得到純度大于99.5％的產品，收率大于60％。

技術領域

本發明涉及多肽合成技術領域，尤其是涉及一種卡貝縮宮素雜質Gly9-OH的制備方法。

背景技術

卡貝縮宮素雜質Gly9-OH序列：Cyclo[CH₂CH₂CH₂CO-Tyr(Me)-Ile-Gln-Asn-Cys]-Pro-Leu-Gly-OH

分子結構式如下：

卡貝縮宮素是一種合成的具有激動劑性質的長效催產素九肽類似物，在工藝合成和存放過程中會產生雜質Gly9-OH,此雜質在生產研究中會一直使用，而此雜質的合成工藝不能沿用卡貝縮宮素工藝進行研究，因此開發一類合成此雜質的合成工藝，有利于該雜質的批量生產是非常必要的。

發明內容

有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供一種卡貝縮宮素雜質Gly9-OH的制備方法，本發明提供的制備方法收率和純度高。

本發明提供了一種卡貝縮宮素雜質Gly9-OH的制備方法，包括：

步驟1：固相合成Fmoc-Leu-樹脂；

步驟2：根據卡貝縮宮素雜質Gly9-OH的肽序，在所述Fmoc-Leu-樹脂上偶聯氨基酸，得到Y-Tyr(Me)-OH-Ile-Gln(X)-Asn(X)-Cys((CH₂)₃COOtBu)-Leu-樹脂；所述氨基酸選自Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys((CH₂)₃COOtBu)-OH、Y-Tyr(Me)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Gln(X)-OH和Fmoc-Asn(X)-OH中的任一種或多種；

步驟3：將所述Y-Tyr(Me)-OH-Ile-Gln(X)-Asn(X)-Cys((CH₂)₃COOtBu)-Leu-樹脂裂解，得到卡貝縮宮素雜質直鏈粗品Y-Tyr(Me)-Ile-Gln(X)-Asn(X)-Cys((CH₃)₃COOtBu)-Leu-OH；

步驟4：將卡貝縮宮素雜質直鏈粗品通過液相縮合偶聯H-Gly-O(Z)，而后脫掉X、Y和tBu保護基得到H-Tyr(Me)-Ile-Gln-Asn-Cys((CH₂)₃COOH)-Leu-Gly-O(Z)；

步驟5：將所述H-Tyr(Me)-Ile-Gln-Asn-Cys((CH₂)₃COOH)-Leu-Gly-O(Z)液相環化得到環化中間肽Cyclo[CH₂CH₂CH₂CO-Tyr(Me)-Ile-Gln-Asn-Cys]-Pro-Leu-Gly-O(Z)；

步驟6：將Cyclo[CH₂CH₂CH₂CO-Tyr(Me)-Ile-Gln-Asn-Cys]-Pro-Leu-Gly-O(Z)脫掉保護基Z，純化，得到卡貝縮宮素雜質Gly9-OH。