[發明專利]一種培育黑豬新品種的毛色性狀快速精準固定方法及應用

在審

• 申請號: 202010949758.5
• 申請日: 2020-09-10
• 公開（公告）號: CN112210608A
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發明（設計）人: 王雪;鄒琴;龔正銀;姜延志;張在林
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;A01K67/02
• 代理公司: 北京風雅頌專利代理有限公司 11403
• 代理人: 鄭穎穎

1.一種培育黑豬新品種的毛色性狀快速精準固定方法，其特征在于，包括：

對培育黑豬新品種的父本、母本、F1代和F2代毛色表型進行毛色表型統計；

根據毛色表型的統計結果，確定F2代的毛色分離規律為孟德爾一對性狀的分離規律，篩選MC1R基因為控制豬黑毛性狀的預設主效基因；

采集培育黑豬新品種的父本、母本、F1代和F2代的毛囊并提取基因組DNA；

采用PCR擴增基因組中的MC1R基因，并進行回收和純化處理，得到純化PCR產物；

對純化PCR產物進行測序，得到MC1R基因的SNP突變位點，并進行基因分型；

分析基因分型中黑白花豬的基因型，確定黑豬的毛色遺傳為單基因控制的顯性遺傳；

選用F2中的黑色純合子基因型的黑豬進行配種，使黑豬新品種的毛色在F3代得以固定。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述基因分型包括成華母豬和F2代純合E^D1E^D1基因型，F1代及F2代雜合E^D1E^P基因型以及巴克夏公豬和F2代黑白花豬E^PE^P純合基因型。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述E^D1E^D1純合型為基于5’端SNP位點和基于外顯子SNP位點的純合基因型，其中，所述基于5’端SNP位點的純合基因型為基于215SNP位點的基因型為AA純合型、基于220位點的基因型為GG純合型、基于242SNP位點的基因型為CC純合型、基于371SNP位點的基因型為GG純合型、基于414SNP位點的基因型為CC純合型以及基于490SNP位點的基因型為AA純合型；所述基于外顯子SNP位點的純合基因型為基于722位點的基因型為AA純合型、基于744SNP位點的基因型為CC純合型、基于802SNP位點的基因型為CC純合型、基于809SNP位點的基因型為CC純合型以及基于1338SNP位點的基因型為AA純合型；

所述E^D1E^P雜合型，為基于5’端SNP位點和基于外顯子SNP位點的雜合基因型，所述基于5’端SNP位點的雜合基因型為基于215SNP位點的基因型為AG雜合型、基于220位點的基因型為AG雜合型、基于242SNP位點的基因型為CT雜合型、基于371SNP位點的基因型為AG雜合型、基于414SNP位點的基因型為CT雜合型以及基于490SNP位點的基因型為AG雜合型；所述基于外顯子SNP位點的純合基因型為基于722位點的基因型為AG雜合型、基于744SNP位點的基因型為CT雜合型、基于802SNP位點的基因型為CT雜合型、基于809SNP位點的基因型為CT雜合型以及基于1338SNP位點的基因型為AG雜合型以及505SNP位點插入兩個CC；

所述黑白花色基因型為E^PE^P型，為基于5’端SNP位點和基于外顯子SNP位點的純合基因型，所述基于5’端SNP位點的基因型為基于215SNP位點的基因型為GG純合型、基于220位點的基因型為AA純合型、基于242SNP位點的基因型為TT純合型、基于371SNP位點的基因型為AA純合型、基于414SNP位點的基因型為TT純合型以及基于490SNP位點的基因型為GG純合型；所述基于外顯子SNP位點的純合基因型為基于722位點的基因型為GG純合型、基于744SNP位點的基因型為TT純合型、基于802SNP位點的基因型為TT純合型、基于809SNP位點的基因型為TT純合型以及基于1338SNP位點的基因型為GG純合型以及505SNP位點插入兩個CC。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，擴增基因組中的MC1R基因的引物對包括第一引物對和第二引物對，其中，所述第一引物對和所述第二引物對的預期產物長度以及第一引物對和第二引物對所針對的MC1R基因區域均不相同。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述第一引物對的預期產物長度為884bp，上游引物在5’端，下游引物在外顯子區域；所述第二引物對的預期產物長度為903bp，上游引物在外顯子區域，下游引物在3’端。