[發明專利]熒光探針Mito-HNO及其制備方法與其在檢測線粒體中HNO的應用在審
| 申請號： | 202010949130.5 | 申請日： | 2020-09-10 |
| 公開（公告）號： | CN112047979A | 公開（公告）日： | 2020-12-08 |
| 發明（設計）人： | 唐波;王慧;李平;聶君偉;王洪統 | 申請（專利權）人： | 山東師范大學 |
| 主分類號： | C07F9/6558 | 分類號： | C07F9/6558;C09K11/06;A61K49/00 |
| 代理公司： | 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 | 代理人： | 王志坤 |
| 地址： | 250014 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 熒光 探針 mito hno 及其 制備 方法 與其 檢測 線粒體 應用 | ||
1.熒光探針Mito-HNO，其特征在于：其結構式為：
2.熒光探針Mito-HNO的制備方法，其特征在于：以化合物4，即羥基部花菁和2-二苯基磷苯甲酸為原料，按照如下反應路線進行反應制備：
3.根據權利要求2所述的熒光探針Mito-HNO的制備方法，其特征在于：羥基部花菁和2-二苯基膦苯甲酸反應的脫水縮合劑為二環己基碳二亞胺(DCC)及4-二甲氨基吡啶(DMAP)。
4.根據權利要求2所述的熒光探針Mito-HNO的制備方法，其特征在于：反應體系的溶劑為二氯甲烷；優選的，二氯甲烷進行除水處理。
5.根據權利要求2所述的熒光探針Mito-HNO的制備方法，其特征在于：羥基部花菁和2-二苯基磷苯甲酸的反應的溫度為20-25℃，反應的時間為10-14h。
6.根據權利要求2所述的熒光探針Mito-HNO的制備方法，其特征在于：2-二苯基磷苯甲酸與二環己基碳二亞胺(DCC)形成活化羧基的中間體的溫度為0-5℃，反應的時間為0.5h。
7.根據權利要求2所述的熒光探針Mito-HNO的制備方法，其特征在于：4-二甲氨基吡啶(DMAP)的濃度為0.25-0.3mmol，二環己基碳二亞胺(DCC)的濃度為5-6mmol。
8.根據權利要求2所述的熒光探針Mito-HNO的制備方法，其特征在于：羥基部花菁的濃度為1-1.5mmol，2-二苯基磷苯甲酸的濃度為5-7.5mmol。
9.權利要求1所述的熒光探針Mito-HNO在靶向定位線粒體檢測HNO中的應用。
10.一種線粒體中HNO的檢測方法，其特征在于，將培養好的細胞放置于含有權利要求1所述的熒光探針Mito-HNO分子的緩沖溶液中孵育，孵育一定的時間后除去孵育液，將孵育后的細胞進行紫外吸收檢測、熒光發射檢測或共聚焦成像檢測。
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