[發(fā)明專利]一種間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清抗衰老培養(yǎng)基

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010945311.0
• 申請(qǐng)日: 2020-09-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111996164A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-11-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 不公告發(fā)明人
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 聊城市人民醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12N5/0775
• 分類號(hào): C12N5/0775
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本文發(fā)明公開(kāi)了一種間充質(zhì)干細(xì)胞抗衰老的無(wú)血清培養(yǎng)液。本發(fā)明的培養(yǎng)基以DMEM/F12為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，外源添加物為人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、人表皮生長(zhǎng)因子、胰島素、L?谷氨酰胺、巰基乙醇、轉(zhuǎn)鐵蛋白、人血清白蛋白、纖粘連蛋白、血小板衍生因子、地塞米松、維生素D₃、維生素C、甘草次酸、大蒜素。本發(fā)明的無(wú)血清培養(yǎng)基成分明確，質(zhì)量可控，可延緩間充質(zhì)干細(xì)胞的老化速率，保持間充質(zhì)干細(xì)胞的活性和功能，可促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及干細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域，特別涉及無(wú)血清培養(yǎng)基及其制備方法和間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

干細(xì)胞及其代表的再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究近二十年來(lái)不斷取得重大技術(shù)突破，干細(xì)胞產(chǎn)業(yè)及臨床應(yīng)用引起了高度重視。間充質(zhì)干細(xì)胞由于具有多種優(yōu)點(diǎn)成為研究與應(yīng)用最為廣泛的干細(xì)胞。間充質(zhì)干細(xì)胞一類具有自我復(fù)制和多向分化能力的細(xì)胞，廣泛存在于骨髓、脂肪、臍帶、臍帶血和胎盤(pán)等組織。間充質(zhì)干細(xì)胞具有取材方便，來(lái)源廣泛，無(wú)倫理學(xué)限制等優(yōu)勢(shì)，還具有自我更新、多向分化能力和免疫調(diào)控作用，可作為理想的種子細(xì)胞，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外已開(kāi)展間充質(zhì)干細(xì)胞的多項(xiàng)臨床研究。

傳統(tǒng)的人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基多含胎牛血清，血清能為干細(xì)胞提供生長(zhǎng)增殖所需的激素、生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)移蛋白和其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。但胎牛血清為動(dòng)物來(lái)源物質(zhì)，成分復(fù)雜且含有異種蛋白，存在批次產(chǎn)品差異大、來(lái)源不穩(wěn)定，還易被病毒和支原體感染，阻礙了間充質(zhì)干細(xì)胞臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用。臨床應(yīng)用的干細(xì)胞制劑制備所用的培養(yǎng)基成分應(yīng)有足夠的純度并符合無(wú)菌、無(wú)致病微生物及內(nèi)毒素的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，殘留的培養(yǎng)基對(duì)受者應(yīng)無(wú)不良影響；在滿足干細(xì)胞正常生長(zhǎng)的情況下，不影響干細(xì)胞的的“干性”及分化能力。因此，成分確定且質(zhì)量可控的抗衰老的無(wú)血清培養(yǎng)基是臨床應(yīng)用MSC培養(yǎng)的必然選擇。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種間充質(zhì)干細(xì)胞抗衰老的培養(yǎng)液及制備方法，在提高間充質(zhì)干細(xì)胞抗衰老的同時(shí)，保持間充質(zhì)干細(xì)胞的活性和功能，提高利用效率，滿足臨床應(yīng)用的需求。本發(fā)明的目的將通過(guò)下面的詳細(xì)描述進(jìn)一步解釋和說(shuō)明。

本發(fā)明的目的在于提供一種間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清抗衰老培養(yǎng)基，包括DMEM/12基礎(chǔ)培養(yǎng)基，還包括如下組分：人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、人表皮生長(zhǎng)因子、胰島素、L- 谷氨酰胺、巰基乙醇、轉(zhuǎn)鐵蛋白、人血清白蛋白、纖粘連蛋白、血小板衍生因子、地塞米松、維生素D3、維生素C、甘草次酸、大蒜素。

本發(fā)明提供的間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清抗衰老培養(yǎng)基，包括DMEM/12基礎(chǔ)培養(yǎng)基，還包括如下組分及其濃度。

優(yōu)選地，本發(fā)明提供的間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清抗衰老培養(yǎng)基，包括DMEM/12基礎(chǔ)培養(yǎng)基，還包括如下組分及其濃度。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述的間充質(zhì)干細(xì)胞為臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞。

本發(fā)明的無(wú)血清培養(yǎng)基成分簡(jiǎn)單清晰，無(wú)批次之間的差異，重復(fù)性好，避免了異種物質(zhì)，減少了細(xì)胞工藝操作過(guò)程中雜質(zhì)的去除過(guò)程，且產(chǎn)品穩(wěn)定，利于間充質(zhì)干細(xì)胞的產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。

下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特別說(shuō)明，均為常規(guī)方法。實(shí)驗(yàn)所用儀器藥品試劑皆可通過(guò)商業(yè)途徑獲得。本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明的一部分而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域的研究人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。本發(fā)明提供的培養(yǎng)液，發(fā)揮傳統(tǒng)中醫(yī)藥優(yōu)勢(shì)，與現(xiàn)代科學(xué)有機(jī)結(jié)合，創(chuàng)造性添加了兩種傳統(tǒng)中藥成分。

實(shí)施例1