[發明專利]一種芍藥甘草湯中化學成分的測定方法及指紋圖譜的建立方法

有效

• 申請號: 202010933688.4
• 申請日: 2020-09-08
• 公開（公告）號: CN114152683B
• 公開（公告）日: 2023-09-26
• 發明（設計）人: 高星;張春容;曹科;李銳;趙麗;徐志毅;王恒
• 申請（專利權）人: 成都華神科技集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王洋

本發明屬于檢測領域，提供一種芍藥甘草湯中化學成分的測定方法及指紋圖譜的建立方法，包括將芍藥甘草湯樣品與溶劑混合，溶解，得待測液；稱取參照物對照品，采用高效液相色譜法，在相同的檢測條件下分別獲得芍藥甘草湯溶液和所述對照品中化學成分的色譜圖，根據對照品的濃度、對照品在色譜圖中的峰面積以及芍藥甘草湯中與對照品相對應的成分在色譜圖中的峰面積，且基于雙波長的檢測條件，以外標兩點法計算芍藥甘草湯中的芍藥苷、甘草苷及甘草酸銨有效成分的含量。本發明實現在相同的色譜條件下，僅僅通過調整波長就能同時識別芍藥甘草湯中的化學成分和對應的化學成分的具體含量的檢測，結果更加準確、可靠，具有良好的重現性和穩定性。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，尤其是涉及一種芍藥甘草湯中化學成分的測定方法及指紋圖譜的建立方法。

背景技術

芍藥甘草湯是一劑處方，本方主治津液受損，陰血不足，筋脈失濡所致諸證。方中芍藥酸寒，養血斂陰，柔肝止痛；甘草甘溫，健脾益氣，緩急止痛。二藥相伍，酸甘化陰，調和肝脾，有柔筋止痛之效。

中藥指紋圖譜是目前中藥產品質量控制主要手段之一，可更全面的反映中藥產品整體特征。目前指紋圖譜研究常用高效液相色譜法、氣相色譜法、薄層色譜法等，其中高效液相色譜法方法重復性好、準確性高，便于推廣與執行。

現有技術CN103330758公開了薄層色譜和指紋圖譜相結合對甘草顆粒的成分進行驗證，但是其分離度不佳，造成了指紋圖檢測結果不準確，不利于芍藥甘草湯產品質量的控制。

發明內容

有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供一種芍藥甘草湯中化學成分的測定方法及指紋圖譜的建立方法，本發明的方法結果準確，分離度佳，穩定性良好。

一方面，與現有技術相比，本發明提供了一種芍藥甘草湯中化學成分的測定方法，包括以下步驟：

S1、取芍藥甘草湯煎液與溶劑混合，超聲溶解，得到待測液；

S2、制備參照物對照品：分別取芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨，加70％甲醇分別制成濃度為100μg/ml的芍藥苷參照物對照品，濃度為50μg/ml的甘草苷參照物對照品和濃度為50μg/ml的甘草酸銨對照品，混合后得到參照物對照品，備用；

S3、采用高效液相色譜法，在相同的檢測條件下分別獲得步驟S1中所述待測液和步驟S2中所述參照物對照品中化學成分的色譜圖，具體的檢測條件如下：

柱溫：25℃～35℃；檢測器波長：甘草苷的含量測定波長為210nm，芍藥苷和甘草酸的測定波長為237nm；

色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，色譜柱：C18；4.6mm×250mm，5μm；流動相流速為0.8～1.2mL/min；所述流動相采用梯度洗脫；

流動相A：乙腈溶液；流動相B：0.05％～0.4％的磷酸溶液；

S4、根據所述參照物對照品的濃度、所述參照物對照品在色譜圖中的峰面積以及芍藥甘草湯中與對照品相對應的成分在色譜圖中的峰面積，且基于步驟S3中的檢測條件，以外標兩點法計算芍藥甘草湯中的芍藥苷、甘草苷及甘草酸銨有效成分的含量。