[發(fā)明專利]非洲豬瘟病毒E120R蛋白作為免疫抑制劑的應(yīng)用及免疫抑制位點(diǎn)敲除毒株的構(gòu)建有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010932707.1 | 申請(qǐng)日： | 2020-09-08 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN112057611B | 公開(kāi)（公告）日： | 2021-04-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 鄭海學(xué);劉會(huì)勝;薛巧;朱紫祥;李攀;馮濤;李豪;馬昭;黨文;楊帆;曹偉軍;劉湘濤 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所 |
| 主分類號(hào)： | A61K39/12 | 分類號(hào)： | A61K39/12;A61P31/20;C12N7/01;C12N15/85;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京力量專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人： | 戴治娟 |
| 地址： | 730046 *** | 國(guó)省代碼： | 甘肅;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 非洲 豬瘟 病毒 e120r 蛋白 作為 免疫抑制劑 應(yīng)用 免疫抑制 位點(diǎn)敲 構(gòu)建 | ||
1.通過(guò)缺失非洲豬瘟病毒E120R蛋白的免疫抑制功能制備非洲豬瘟重組病毒的應(yīng)用，其特征在于，所述缺失包括將編碼非洲豬瘟病毒E120R蛋白72-73位氨基酸的核苷酸序列缺失。
2.一種E120R蛋白免疫抑制功能喪失的非洲豬瘟重組病毒，其特征在于，將非洲豬瘟病毒中編碼非洲豬瘟病毒E120R蛋白72-73位氨基酸的核苷酸序列缺失。
3.如權(quán)利要求2所述的非洲豬瘟重組病毒，其特征在于，所述非洲豬瘟病毒為CN/GS/2018分離株。
4.一種非洲豬瘟疫苗，其特征在于，所述疫苗包含權(quán)利要求2或3所述的E120R蛋白免疫抑制功能喪失的非洲豬瘟重組病毒。
5.一種E120R蛋白免疫抑制功能喪失的非洲豬瘟重組病毒的制備方法，其特征在于，所述方法為：通過(guò)基因工程手段使編碼非洲豬瘟病毒E120R蛋白72-73位氨基酸的核苷酸序列缺失。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述非洲豬瘟病毒為CN/GS/2018分離株。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法為同源重組技術(shù)，所述方法包括以下步驟：
（1）選取編碼E120R蛋白72-73位氨基酸基因片段上下游序列約1.0kb作左右為同源重組左臂和右臂，并分別克隆入pUC19載體中，獲得重組轉(zhuǎn)移載體；
（2）在步驟（1）所述重組轉(zhuǎn)移載體左、右臂基因序列中插入篩選表達(dá)盒基因片段，獲得同源重組轉(zhuǎn)移載體；
（3）將步驟（2）所述同源重組轉(zhuǎn)移載體轉(zhuǎn)染至感染了親本非洲豬瘟毒株的 BMDM細(xì)胞，純化篩選獲得E120R蛋白免疫抑制功能喪失的非洲豬瘟重組病毒。
8.如權(quán)利要求5-7任一所述方法制備獲得的E120R蛋白免疫抑制功能喪失的非洲豬瘟重組病毒。
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