[發明專利]甲基萘醌-7在制備防治缺氧/缺血腦損傷疾病藥物中的應用

在審

• 申請號: 202010927735.4
• 申請日: 2020-09-07
• 公開（公告）號: CN111920792A
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 楊日云;王曉冬;潘靜瑩;陳穎;李奕;吳堅
• 申請（專利權）人: 南通大學
• 主分類號: A61K31/122
• 分類號: A61K31/122;A61P9/10
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 黃欣

本發明公開了甲基萘醌?7在制備防治缺氧/缺血腦損傷疾病藥物中的應用，屬于醫藥技術領域。本發明以星形膠質細胞為切入點，闡明了MK?7對缺氧/缺血性腦損傷保護作用的分子機制，結果表明，MK?7通過抑制星形膠質細胞的氧化應激，線粒體功能障礙和炎癥反應，改善了低氧誘導的細胞毒性。本發明為臨床上防治缺氧/缺血性腦損傷和MK?7更廣泛地應用提供理論支持。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及甲基萘醌-7在制備防治缺氧/缺血腦損傷疾病藥物中的應用。

背景技術

星形膠質細胞是大腦中廣泛分布的細胞類型，其可以產生營養因子、合成和分泌神經遞質、清除毒素，維持大腦的穩態。星形膠質細胞在缺氧/缺血性腦損傷中的病理生理作用最近引起了人們的廣泛關注，當缺氧/缺血超過機體耐受水平時，星形膠質細胞受損，產生炎性細胞因子，并能促進鄰近神經元死亡，增加對大腦的損傷。因此，尋找有效的治療損傷星形膠質細胞的藥物將為缺氧/缺血性腦損傷提供有價值的貢獻。

維生素K-2(vitamin K2,VK2)是一系列被稱為甲基萘醌的化合物，其一共有14個異構體；它們有一個共同的核心分子—甲基醌，根據其側鏈含有的不飽和異戊二烯基單元的數量進行分類。甲基萘醌-7(menaquinone-7,MK-7)是VK2家族中最佳的生物活性形式，并且其生物利用度最高。

當缺氧/缺血超過機體耐受水平時，星形膠質細胞受損，產生炎性細胞因子，并能促進鄰近神經元死亡，增加對大腦的損傷。因此，尋找有效的治療損傷星形膠質細胞的藥物將為缺氧/缺血性腦損傷提供有價值的貢獻。在許多國家，MK-7已被用作預防或逆轉骨質疏松癥和心血管疾病的治療營養素；但其在缺氧/缺血性腦損傷中的作用未見報道。

發明內容

本發明的目的是提供甲基萘醌-7在制備防治缺氧/缺血性腦損傷疾病的藥物中的應用。

本發明以星形膠質細胞為切入點，通過研究發現MK-7可以增加缺氧星形膠質細胞的活力和增殖。同時，MK-7可以使星形膠質細胞在低氧條件下的形態趨于正常；MK-7可以通過平衡ROS的產生和優化ATP的生成來逆轉線粒體功能障礙，從而減少缺氧誘導的星形膠質細胞氧化應激損傷；MK-7可以減少缺氧星形膠質細胞中促炎細胞因子和趨化因子的表達。由此推斷，MK-7為缺氧星形膠質細胞提供了一種有希望的保護治療，并可能有助于缺氧/缺血性腦損傷。

進一步地，本發明還闡明了MK-7對缺氧/缺血性腦損傷保護作用的分子機制。缺氧導致星形膠質細胞的Gas6表達降低，但MK-7預處理可明顯增加Gas6水平；在缺氧條件下，Gas6與MK-7具備的星形膠質保護作用緊密相連，用siRNA沉默星形膠質細胞的Gas6表達，可明顯減弱MK-7對星形膠質細胞的保護作用。

在本發明中確定了MK-7可以保護缺氧誘導的星形膠質細胞損傷，并探討了其作用機制，為臨床上防治缺氧/缺血性腦損傷和MK-7更廣泛地應用提供理論支持。

附圖說明

圖1為實施例1中MK-7促進缺氧星形膠質細胞存活和增殖的結果。原代星形膠質細胞在低氧條件下培養4、6、8和12h，用CCK-8法(A)或BrdU法(B)測定細胞活力和增殖。在常氧條件下，用增加MK-7濃度的方法對星形膠質細胞進行72h的預處理，然后分析細胞活力(C)和增殖(D)。用CCK-8法(E)或BrdU法(F)檢測低氧條件下MK-7預處理星形膠質細胞的細胞活力和增殖。G.原代星形膠質細胞膠質纖維酸性蛋白的免疫熒光(標尺：200μm)。H.在常氧或低氧條件下培養12h的星形膠質細胞在150μM MK-7預處理30h的存在或不存在下的形態學改變的代表性圖像(標尺：200μm)。注：*p0.05，**p0.01，***p0.001與常氧組比較；#p0.05，##p0.01與單獨缺氧處理的細胞相比；n＝6個獨立實驗。