[發明專利]一種自動化免疫印跡實驗裝置及方法

在審

• 申請號: 202010922790.4
• 申請日: 2020-09-04
• 公開（公告）號: CN111948416A
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發明（設計）人: 李坤
• 申請（專利權）人: 杭州醫學院
• 主分類號: G01N35/00
• 分類號: G01N35/00;G01N35/02;G01N33/53;G01N27/447
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 彭劍;胡紅娟

本發明公開了一種自動化免疫印跡實驗裝置及方法，其中裝置包括框架以及固定在框架內的水平隔板，水平隔板將框架分成上下兩層；框架內設有：試劑加樣模塊、試劑回收模塊、反應盒、振蕩搖籃、試劑液體分配及回收模塊、程序設置處理模塊和電源模塊。本發明可根據實驗需要利用內置模塊對反應時間、分配液體、振蕩與否、是否回收液體、操作循環次數等參數進行編程設置，實現轉膜后所需的多步反應及多步重復洗膜步驟完全自動化。本發明裝置及方法可大幅減少人工反復的重復操作、減少時間碎片化，極大提高工作效率、節省人力；同時具有試劑回收和振蕩功能，可節約試劑成本并保證實驗效果，無需增加額外消耗品；較傳統手工操作，具有顯著優點。

技術領域

本發明屬于分子生物學實驗室用品領域，尤其是涉及一種自動化的聚丙烯酰胺凝膠電泳-免疫印跡實驗裝置及方法。

背景技術

聚丙烯酰胺凝膠電泳-免疫印跡實驗可通過已知抗體檢測待測樣本中是否存在抗原，是分子生物學研究常見的一種方法。該方法通常包括三個重要環節，第一個環節，對含有抗原蛋白樣品進行十二烷基硫酸鈉(SDS)-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)；第二個環節，將在凝膠中已分離的蛋白電轉移至硝酸纖維素膜(NC)或聚偏二氟乙烯膜(PVDF)上；第三個環節，將印有蛋白質條帶的NC或PVDF依次與特異性抗體和酶標第二抗體進行抗原抗體反應之后，用相應的酶底物作用后進行酶免疫定位。

在酶免疫定位環節，為了避免膜上存在目標抗原與目標抗體之外的非特異性結合，除讓目標抗原與目標抗體反應一段時間外，還需要用含有蛋白的封閉液進行封閉、同時還需要用緩沖液進行反復多次的持續不斷洗膜、換液等過程。

如公開號為CN204503657U的中國專利文獻公開的一種免疫印跡實驗洗滌盒，公開號為CN209784374U的中國專利文獻公開的一種夾取式免疫印跡分析儀，都采用便于操作人員的操作的設置來提高實驗效率。

然而，上述過程通常為人工操作，洗滌的時間及步驟在每次之間也會造成誤差；經常需要人為定時守候，使操作人員的時間碎片化，造成勞動強度大，工作效率低。

盡管目前有全自動免疫印跡儀可使用，但在電泳之后的檢測原理，與傳統的免疫印跡方法不同，而且儀器本身及其耗材其價格高昂，不是每個實驗室均能負擔。

因此，有必要開發一種價格低廉、簡便實用的免疫印跡操作裝置以減輕勞動力，極大提高工作效率，保證實驗效率，節約實驗成本，較傳統手工操作，無需增加額外消耗品。

發明內容

本發明提供了一種自動化免疫印跡實驗裝置及方法，極大地提高了效率，減少人工操作，同時，節約試劑成本并保證實驗效果。

一種自動化免疫印跡實驗裝置，包括框架以及固定在框架內的水平隔板，所述的水平隔板將框架分成上下兩層；所述的框架內設有：

試劑加樣模塊，設置在框架的上層，包括承載試劑容器的位置及多個用于實驗提供試劑的試劑容器；

試劑回收模塊，設置在框架的下層，包括承載回收容器的位置及多個用于試驗結束后試劑回收的回收容器，所述的回收容器數量可根據需要與試劑容器對應。

反應盒，設置在框架下層，用于載有目標蛋白的膜與相應的抗體進行反應或用不同緩沖液洗滌；

試劑液體分配及回收模塊，包括多個與回收容器、試劑容器對應的電磁閥門；每個電磁閥門設有三個接口，分別通過導管連接至反應盒以及對應的試劑容器、回收容器；

程序設置處理模塊，與試劑液體分配及試劑回收模塊電連接，用于參數設定及實驗操作步驟編程設置，根據設定的時間加注相應操作步驟的試劑至反應盒，并根據設定的時間將相應操作步驟完成的試劑從反應盒抽離到對應的回收容器內；

電源模塊，與程序設置處理模塊電連接，用于提供電能。