[發明專利]一種藍莓花青素的提取分離純化方法

有效

• 申請號: 202010922186.1
• 申請日: 2020-09-04
• 公開（公告）號: CN111978280B
• 公開（公告）日: 2023-02-28
• 發明（設計）人: 李斯文;顧月清;翟悅雯
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62;C09B61/00;C09B67/54
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 孫斌

1.一種藍莓花青素的提取分離純化方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將藍莓果清洗干凈并晾干，用鹽水浸泡，再用清水洗凈晾干，進行破碎處理，得藍莓果漿；

（2）向上述藍莓果漿中加混合酶Ⅰ，進行酶解，獲得果漿酶解液Ⅰ；

（3）向上述果漿酶解液Ⅰ中加入酸性乙醇溶液作為提取劑，并置于玻璃容器中，做密封處理；

（4）將密封后的玻璃容器進行超聲提取，獲得超聲提取產物，并進行減壓過濾，得到粗提液；

（5）向上述粗提液中加入混合酶Ⅱ，靜置酶解，并將酶解液真空濃縮；

（6）將上述濃縮液洗脫純化，并將洗脫液真空濃縮冷凍干燥，得干燥后的藍莓花青素提取產物；

所述混合酶Ⅰ成分為纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶及木瓜蛋白酶；所述混合酶Ⅱ的成分為α-葡萄糖苷酶及α-鼠李糖苷酶；

所述混合酶Ⅰ中纖維素酶：半纖維素酶：果膠酶：木瓜蛋白酶的質量比為5:1:2:1，采用纖維素酶為4000U/g、半纖維素酶1000U/g、果膠酶1000U/g、木瓜蛋白酶1000U/g，混合酶Ⅰ與果漿比例為16-20g/kg果漿，酶解時間為1.5-2h；

所述混合酶Ⅱ中α-葡萄糖苷酶：α-鼠李糖苷酶的質量比為3:1，兩種酶活力均為1000U/g，混合酶Ⅱ與粗提液比例為4g/L，酶解時間為1h-1.5h；

步驟（4）所述超聲溫度設定50℃，功率設定500w，時間0.5h-1h。

2.根據權利要求1所述的藍莓花青素的提取分離純化方法，其特征在于，步驟（1）所述鹽水浸泡步驟中，采用鹽水的質量分數為10-15%，浸泡時間為0.5h-1h。

3.根據權利要求1所述的藍莓花青素的提取分離純化方法，其特征在于，步驟（3）所述酸性乙醇溶液作為提取劑中酸性乙醇體積分數為60-70%，含有體積分數0.02-0.5%的冰醋酸，比例為3L/kg果漿酶解液Ⅰ，使用檸檬酸溶液調節pH值至3-4。

4.根據權利要求1所述的藍莓花青素的提取分離純化方法，其特征在于，步驟（6）所述洗脫純化中采用大孔樹脂柱，上樣量為0.1～0.5倍樹脂柱體積，吸附0.5～24h，并用蒸餾水沖柱，乙醇溶液洗脫。

5.根據權利要求4所述的藍莓花青素的提取分離純化方法，其特征在于，所述大孔樹脂柱采用AB-8或DX101型大孔樹脂柱。

6.根據權利要求1所述的藍莓花青素的提取分離純化方法，其特征在于，步驟（6）所述真空濃縮步驟溫度為45℃，冷凍干燥溫度為-40℃，時間24h-48h。