[發(fā)明專利]與毛白楊生長相關(guān)基因的分子標記、篩選方法、試劑盒及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010908115.6
• 申請日: 2020-09-02
• 公開（公告）號: CN112063738B
• 公開（公告）日: 2023-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張漢堯;卞雯;劉小珍;魏卓;張智銘;王素杰
• 申請（專利權(quán)）人: 西南林業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6809;C12N15/11
• 代理公司: 昆明祥和知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 53114
• 代理人: 董昆生

本發(fā)明屬于林業(yè)分子育種技術(shù)領(lǐng)域，具體公開一種與毛白楊生長相關(guān)基因的分子標記、篩選方法、試劑盒及應(yīng)用，包括標記堿基序列為SEQIDNO.1的AUX1，SEQIDNO.2的CYCD3的應(yīng)用，本發(fā)明提供的標記基因組合AUX1、CYCD3，及相應(yīng)的引物試劑盒的應(yīng)用，可以在毛白楊生長的早期就能夠高效、準確地鑒定出生長快的單株，從而大大加速育種進程，縮短選育周期，對比單個基因片段標記，使用本發(fā)明提供的組合，準確率更高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于林業(yè)分子育種技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種與毛白楊生長相關(guān)基因的分子標記、篩選方法、試劑盒及應(yīng)用。

背景技術(shù)

三倍體毛白楊屬楊柳科楊屬白楊派植物，具有速生、優(yōu)質(zhì)、高效、抗逆性較強、用途廣等特點，具有良好的倍性優(yōu)勢，較二倍體毛白楊有更好的遺傳改良效果。生長5年即可輪伐，出漿率為普通楊樹的2倍，是制造高檔新聞紙和膠印書紙的理想原料，也是民用、建筑、家具用材的常用原料。篩選毛白楊生長相關(guān)的主要基因，并在毛白楊的遺傳育種改良過程中應(yīng)用，將有利于應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)，選擇生長速率快，性狀優(yōu)良的品種，目前該方面的研究未見報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的主要目的是提供與毛白楊生長相關(guān)基因的分子標記、試劑盒，以解決現(xiàn)有技術(shù)中，針對毛白楊育種時，快速篩選生長速率快，性狀優(yōu)良的品種。

本發(fā)明的另一個目的是提供一種與毛白楊生長相關(guān)基因序列的篩選方法，以確保篩選得到的基因是和毛白楊快速生長性狀相關(guān)的基因，且在毛白楊中顯著表達，增加后期分子標記輔助育種時，篩選的準確性。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了與毛白楊生長相關(guān)基因的分子標記，所述分子標記包括堿基序列為SEQIDNO.1?的 AUX1和SEQIDNO.2的 CYCD3。

進一步地，本發(fā)明提供了測定與毛白楊生長相關(guān)基因的引物對，包括測定 AUX1基因的引物上游SEQIDNO.3和下游SEQIDNO.4， CYCD3基因的引物上游SEQIDNO.5和下游SEQIDNO.6。

進一步地，本發(fā)明提供了一種檢測快生長速率毛白楊的試劑盒，所述試劑盒包括堿基序列為SEQIDNO.3-?SEQIDNO.6的引物。

優(yōu)選的，所述的與毛白楊生長相關(guān)基因的分子標記主要應(yīng)用在輔助毛白楊育種過程中，快速使用分子標記技術(shù)測試和挑選生長速度快，性狀優(yōu)良的品種。

進一步地，本發(fā)明提供了一種與毛白楊生長相關(guān)基因序列的篩選方法，包含以下步驟：

（1）選取野外一年生二倍體三倍體毛白楊根萌條為材料，利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)篩選二倍體、三倍體毛白楊生長相關(guān)基因；

（2）將選取的野生二倍體和三倍體毛白楊葉片進行組培，獲得相同狀態(tài)及生理年齡下的組培苗；

（3）提取二倍體、三倍體毛白楊組培苗莖段的總RNA，進行實時熒光定量驗證，確定毛白楊生長相關(guān)的主要基因，分別是堿基序列為SEQIDNO.1?的 AUX1，?SEQIDNO.2的 CYCD3。