[發明專利]Gustavus基因及其應用、由其合成的dsRNA及dsRNA的制備方法與應用

有效

• 申請號: 202010904420.8
• 申請日: 2020-09-01
• 公開（公告）號: CN112029772B
• 公開（公告）日: 2022-06-07
• 發明（設計）人: 高陽;彭靜;張德詠;劉勇;任瑞凡;張卓;朱春暉;程菊娥;鄭立敏;史曉斌
• 申請（專利權）人: 湖南省植物保護研究所
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/113;C12N15/10;A01N57/16;A01P7/04
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務所(普通合伙) 43008
• 代理人: 陳暉

1.一種Gust avus基因在防控蚜蟲中的應用，其特征在于，所述Gustavus基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示；所述蚜蟲為桃蚜，所述應用方法為：抑制蚜蟲中Gustavus基因的表達，進而抑制蚜蟲的繁殖。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述Gustavus基因以桃蚜的cDNA為模板，以Primer01和Primer02為引物，進行PCR擴增得到；所述Primer01的DNA序列如SEQ ID NO.4所示，所述Primer02的DNA序列如SEQ ID NO.5所示。

3.一種dsRNA的防控蚜蟲中的應用，其特征在于，所述dsRNA根據權利要求1所述的Gustavus基因合成；所述dsRNA的核苷酸序列為SEQ ID NO.3所示；所述蚜蟲為桃蚜。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述dsRNA的制備包括以下步驟：

S1、以Gustavus基因的DNA序列為模板，合成Gustavus基因片段；

S2、以Gustavus基因片段作為模板，設計含有T7啟動子序列的引物對；

S3、通過PCR擴增得到所述dsRNA合成模板；

S4、體外合成dsRNA。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述S1具體為：根據Gustavus基因的DNA序列設計引物對，以Gustavus基因的DNA序列為模板，進行PCR擴增，得到Gustavus基因片段。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述引物對包括Primer03和Primer04，其中，所述Primer03的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述Primer04的核苷酸序列如SEQ IDNO.7所示；

和/或，所述Gustavus基因片段的DNA序列如SEQ ID NO.2所示。

7.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述S2中所述含有T7啟動子序列的引物對包括Primer05和Primer06，所述Primer05的DNA序列如SEQ ID NO.8所示；所述Primer06的DNA序列如SEQ ID NO.9所示。