[發(fā)明專利]一種HPLC法測定十字花科蔬菜中蘿卜硫素和萊菔素的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010902900.0 | 申請日: | 2020-09-01 |
| 公開(公告)號: | CN111983099A | 公開(公告)日: | 2020-11-24 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 王玉濤;蔡達(dá);趙玉華;劉俊華;秦宏偉;張瀟 | 申請(專利權(quán))人: | 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所 |
| 主分類號: | G01N30/02 | 分類號: | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司: | 濟南誠智商標(biāo)專利事務(wù)所有限公司 37105 | 代理人: | 韓百翠 |
| 地址: | 250100 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 hplc 測定 十字花科 蔬菜 蘿卜 萊菔 方法 | ||
1.一種HPLC法測定十字花科蔬菜中蘿卜硫素和萊菔素的方法,其特征是,
1)前處理
稱取十字花科蔬菜勻漿樣品于離心管中,加入pH 5.2磷酸緩沖液,混勻,置于20-30℃水解,然后加入乙酸乙酯萃取,離心,取上層有機相,置于旋蒸瓶中,再重復(fù)萃取1-2次,合并萃取液,利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至近干,用甲醇水溶液定容,過濾膜,得到試樣溶液待HPLC分析測定;
2)HPLC分析的色譜條件
色譜柱:C18色譜柱,規(guī)格:250mm×4.6mm,5μm;
流動相A:0.1%磷酸-水溶液;流動相B:乙腈;
萊菔素檢測波長:225nm;蘿卜硫素檢測波長:254nm;
柱溫:30℃;
流速:1mL/min;
進(jìn)樣量:10μL;
3)標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
配制蘿卜硫素和萊菔素的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,以保留時間定性,外標(biāo)法定量,通過標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度與相應(yīng)的峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;
4)檢測
試樣溶液HPLC測定,以保留時間定性,外標(biāo)法定量,以試樣溶液中蘿卜硫素或萊菔素的峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,從而得到相應(yīng)的蘿卜硫素或萊菔素的濃度。
2.如權(quán)利要求1所述的一種HPLC法測定十字花科蔬菜中蘿卜硫素和萊菔素的方法,其特征是,所述梯度洗脫條件如下:
3.如權(quán)利要求1所述的一種HPLC法測定十字花科蔬菜中蘿卜硫素和萊菔素的方法,其特征是,所述的十字花科蔬菜包括蘿卜、大白菜、西蘭花、小白菜、卷心菜。
4.如權(quán)利要求1所述的一種HPLC法測定十字花科蔬菜中蘿卜硫素和萊菔素的方法,其特征是,所述步驟1)的甲醇水溶液為:按體積比,甲醇:水=7:3。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項所述的一種HPLC法測定十字花科蔬菜中蘿卜硫素和萊菔素的方法,其特征是,所述步驟1)前處理為:稱取十字花科蔬菜勻漿樣品1.000g于50mL離心管中,加入pH 5.2磷酸緩沖液3mL,混勻,置于25℃水解1h,然后加入乙酸乙酯40mL,萃取30min,以4500r/min離心5min,取上層有機相,置于旋蒸瓶中,再重復(fù)萃取2次,合并萃取液,利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至近干,用1mL甲醇水溶液定容,過0.22μm濾膜,待HPLC分析測定。
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